Isolation and characterization of BliAI, an isoschizomer of ClaI from Bacillus licheniformis

ABSTRACT

The restriction endonuclease BliAI, an isoschizomer of ClaI, which recognizes the sequence 5'- ATFACE="Symbol">¼CGAT - 3', was purified from a natural isolate identified as Bacillus licheniformis. The restriction endonuclease was isolated from cell extracts using single-step purification by phosphocellulose column chromatography. The restriction endonuclease is active at 37°C and over a wide range of pH and salt concentration. The molecular weight of the purified restriction enzyme is consistent with a value of 39 kDa.

RESUMO

A endonuclease de restrição BliAI, um isoesquisômero de ClaI, que reconhece a seqüência 5'- ATFACE="Symbol">¼CGAT - 3', foi purificada de um isolado natural identificado como Bacillus licheniformis. A endonuclease de restrição em questão foi isolada a partir de um extrato celular em um único passo cromatográfico utilizando uma coluna contendo a resina fosfocelulose. A endonuclease de restrição é ativa à 37°C e em uma ampla escala de pH e concentração de sais. O peso molecular da enzima purificada corresponde a um valor de kDa 39.