El estrés oxidativo y la señal inflamatoria modulan la expresión del factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF) en células humanas del epitelio pigmentario de la retina / Oxidative stress in inflamatory signal modulates the expression of vascular endotelial grouth factor (UEGF) un human epitelial pigmentary cells of the retine

RESUMEN

Objetivo: el factor de crecimiento vascular endotelial (VEGF) está expresado en la glía y en las células del epitelio pigmentario de la retina. Citoquinas y factores de crecimiento están asociados con la activacióncelular de función autócrina. La señal proinflamatoria inducida por interleuquina 1 (IL-l) y el estrés oxidativo activan la expresión gen ética de este factor de crecimiento.El objetivo de este trabajo es investigar el efecto de la IL-l y el estrés oxidativo generado por el factor de necrosis tumoral (TNF-a) y el peróxido de hidrógeno (H202) en la expresión del VEGF en células humanas del epitelio pigmentario de la retina (ARPE-19).Métodos: las células ARPE-19 son transfectadas por el método DOTAP con el promotor (1,6 kb) VEGF unido a un gen de luciferasa. Despúes de 3 horas de transfección las células fueron lavadas e incubadas porotras 8 a 10 horas antes de agregarles los inductores. Las células fueron incubadas por 6 horas en un medio desprovisto de nutrientes antes de agregarles IL-l ¡3, TNF-a y H2O2, y se incubaron durante 8 horas.La actividad de luciferasa fue medida usando como sustrato a la luciferina. Las células apoptóticas fueron detectadas mediante el uso de un microscópio de fluorescencia confocal usando la tinción Hoechst.Resultados: los resultados obtenidos indican que la IL-l¡3 y el TNF-a aumentan moderadamente la expresión del VEGF en células del ARPE-19. Por otro lado la suma del TNF-a y el H2O2 aumentan considerablemente la expresión del VEGF. La tinción Hoeschst de células transfectadas con el VEGF muestra la apoptósis celular producida por el estrés oxidativo.Conclusiones: diferentes citoquinas y el estrés oxidativo inducen la sobreexpresión del VEGF mediada por diferentes quinasas y factores nucleares en las ARPE-19. Esta expresión puede participar en la apoptosis celular de diferentes patologías retineanas como la retinopatia diabética. El estudio e identificación de esta vía celular puede ser potencialmente útil como blanco...