Cultivo primario de células ciliadas de adenoides humanos: un modelo experimental para evaluar la actividad ciliar in vitro / Primary culture of human adenoid ciliated cells: an experimental model to evaluate ciliar activity in vitro

RESUMEN

Introducción: El clearance mucociliar normal es el mecanismo de defensa básico de las vías respiratorias. Sin embargo, los mecanismos de control ciliar aún se desconocen. Con el fin de entenderlo mejor, se han desarrollado diferentes técnicas de cultivo de células ciliadas. Objetivos: Desarrollar un modelo experimental a partir de cultivos primarios de tejido adenoideo y cornete medio. Caracterizarla respuesta a adenosin trifosfato (ATP), agonista conocido de la frecuencia de batido ciliar (FBC). Material y método: Cultivos primarios a partir de explantes de epitelio adenoideo y cornete medio humano. Medición de FBC, con técnica de microfotodensitometría, en condición basal y en respuesta a ATP a diferentes concentraciones. Resultados: La FBC basal (promedio (X) + - desv estándar (DE)) para los cultivos de cornete medio fue 11,9 + -1,5 Hz y para tejido adenoideo fue 10,9 + - 1,9 (p >0,05). Se observó un aumento en la FBC en respuesta a ATP, dosis dependiente. No hubo diferencia significativa en la FBC basal ni en la respuesta a ATP entre cultivos de cornete medio y adenoides. Conclusión: El cultivo primario de células ciliadas nasales a partir de explantes de adenoides, es un modelo experimental reproducible, en el que es posible observar actividad ciliary una respuesta funcional concordante con lo descrito en la literatura.

ABSTRACT

Introduction. Mucociliary clearance constitutes the main defense mechanism of the airway, but the mechanisms of ciliary control are still unknown. With the aim of a better understanding of this process, many ciliated cells culture techniques have been developed. Aims. 1. To develop an experimental model based on primary cultures from adenoid and middle turbinate tissue. 2. To characterize in this model the response to ATP, a known agonist of ciliary beat frequency (CBF). Material and Method. Primary cultures derived from human adenoid tissue and middle turbinate epithelial explants were obtained. CFB was measured by microphotodensitometry, both in basal conditions and in response to ATP at different concentrations. Results. Basal CFB (average (X) +- standard deviation (SD)) for middle turbinate cultures was 11.9 +-1.5 Hz, and for adenoid tissue was 10.9 +-1.9 Hz (p< 0.05). A CBF increase was observed in response to ATP, in a dose-dependent manner. No significant difference in basal CFB or in response to ATP was found between middle turbinate and adenoid cultures. Conclusion. Primary culture of nasal ciliated cells derived from adenoid explants is a reproducible experimental model, in which it is possible to observe both ciliary activity and a functional response in accordance to what has been reported in the literature.