An ELISA method using serum derived HDAg for the sorological detection of HDV antigens and antibodies

RESUMO

Um dos maiores problemas no desenvolvimento de metodologia para detecçäo de antígenos e anticorpos do vírus da hepatite delta (VHD) tem sido a fonte de antígenos uma vez que fígados humanos e de animais infectados pelo VHD säo de difícil obtençäo e baixo rendimento. Ao uso de soro de pacientes na fase aguda da infecçäo pelo VHD, como fonte de antígenos associamos a técnica imunoenzimática, com finalidade de facilitar o manuseio e economizar antígeno. O antígeno delta foi obtido a partir do soro de indivíduo na fase aguda de infecçäo por VHD e o anticorpo a partir de soro deportadores crônicos de VHD. Para a detecçäo do antígeno foi empregado o método "sanduiche" e para a detecçäo do anticorpo um ensaio tipo competiçäo. Visando testar a especificidade e a sensibilidade relativas do novo método de detecçäo de anticorpo, foram feitas comparaçöes do mesmo com radio-imunoensaio comercial (CRIE, Lab. Abbott) e um radio-imunoensaio desenvolvido na Unité 271-INSERM de Lyon, França (NC-RIA). Soros de 42 pacientes foram testados pelos três métodos, sendo observados resultados discrepantes em apenas 2 casos. Os autores concluem que: 1) soros de pacientes na fase aguda e crônica da infecçäo pelo VHD podem ser usados como fonte de antígeno e anticorpos em ensaios imunológicos 2) o EIE e o RIE tem especificidade e sensibilidade relativas comparáveis 3) o EIE é de fácil execuçäo, mais barato, näo poluente, tem vida útil maior, além de proporcionar economia de antígeno