Conversão in vitro de taquizoítos em bradizoítos de toxoplasma gondii em células musculares esqueléticas / Conversion in vitro of tachyzoite in bradyzoite of toxoplasma gondii in skeletal muscle cells

RESUMO

A diferenciação no desenvolvimento é um processo fundamental em organismos vivos. É essencial em organismos multicelulares e comum entre procariotos e eucariotos unicelulares. No caso de protozoários parasitas, tal diferenciação é frequentemente um processo obrigatório que distingue estágios do ciclo de vida sendo requerido para (i) reprodução sexual, (ii) transmissão entre os hospedeiros mamíferos e vetores invertebrados, ou para (iii) sobrevivência dentro de diferentes nichos no hospedeiro. Embora seja do conhecimento que Toxoplasma gondii forma cistos preferencialmente no cérebro e na musculatura esquelética, pouca atenção tem sido dada às células musculares esqueléticas como um tipo celular para estudo da estágio-conversão do parasito. A persistência na musculatura esquelética é crítica para a sua transmissão para humanos através da ingestão de carne crua ou mal passada. na presente tese, culturas primárias de células musculares esqueléticas (CME) foram altamente diferenciadas, apresentando miotubos que contraíam espontaneamente e expressavam marcadores específicos, tais como Myf5, MyoD e desmina. Com o objetivo de investigar in vitro a diferenciação do Toxoplasma, CME foram infectadas com taquizoítos de Toxoplasma e a estágio-conversão entre taquizoítos e bradizoítos analisadas até seis dias após infecção por imunofluorescência. A diferenciação dos taquizoítos teve início espontaneamente após 1 dia de infecção apresentando a seguinte taxa de vacúolos contendo bradizoítos 0por cento (4h), 23,8(mais ou menos)3,4% (1dpi); 31,0(mais ou menos)2,0% (2dpi); 33,0(mais ou menos)3,5% (4dpi) e 46,0(mais ou menos)3,5% (6dpi). Após 2 e 4 dias de infecção, vacúolos contendo bradizoítos e rosetas de Toxoplasma em estágio conversão assincrônica foram detectados. Com o objetivo de checar se o tipo celular é determinante neste intrigante fenômeno, os mesmos experimentos foram realizados em dois outros tipos de células...