Selection of culture media and in vitro assessment of temperature-dependent development of Nomuraea rileyi / Seleção do meio de cultura e avaliação in vitro do desenvolvimento de Nomuraea rileyi dependente da temperatura

ABSTRACT

In vitro development - radial growth and sporulation - of Nomuraea rileyi isolates from Anticarsia gemmatalis Hübner and Plusiinae larvae was studied on four culture media Sabouraud, maltose, agar and yeast - SMAY; SMAY plus rice extract - SMAYR; complete medium for N. rileyi - CMNr and maltose agar yeast with potato extract - MAYP. Their development on a selected medium (MAYP) was analysed at five temperatures. Two mathematical models were fitted to in vitro and in vivo temperature dependent radial growth rates and thermal requirements were estimated. The medium with potato and yeast extract induced the highest growth rate in most cases, while SMAY induced the lowest rates for the tested isolates. Estimated optimum temperatures for mycelium in vitro growth ranged from 22°C to 26°C. No differences between the proportion of sporulation of colonies maintained at 20°C and 26°C were detected. Few or no colonies sporulated at 12, 16 and 30°C. The relative production of conidia per fungal biomass was very variable, ranging from 0.5 to 16 conidia per centigram of mycelium. Therefore, this was not a useful criterion for selecting a culture medium. Based on present findings, a medium based on potato extract, or enriched slices could be used for N. rileyi experimental and eventually mass production. Because of the similarities found between in vitro and in vivo thermal requirements, thermal traits of the mycosis could be simply estimated on the basis of the environmental temperature.

RESUMO

O desenvolvimento in vitro de isolados de Nomuraea rileyi, obtidos de larvas de Anticarsia gemmatalis Hübner e de Plusiinae, foi estudados em quatro meios de cultura Sabouraud, maltose, agar e levedura - SMAY; SMAY com extrato de arroz - SMAYR; meio completo para N. rileyi - CMNr; e maltose, agar, levedura com extrato de batata - MAYP. Seu crescimento radial em MAYP foi analisado sob cinco temperaturas. Foi estudada a esporulação em relação à temperatura, e a produção de conídios nos quatro meios testados. Dois modelos matemáticos foram aplicados para descrever as taxas de desenvolvimento radial dependentes da temperatura in vitro e in vivo. MAYP permitiu a maior taxa de crescimento, porém SMAY provocou as taxas mais baixas para os isolados testados. As temperaturas ótimas estimadas para o crescimento do micélio in vitro variam de 22°C a 26°C. A esporulação não variou entre 20°C e 26°C. As temperaturas de 12, 16 e 30°C observou-se pouca ou nenhuma esporulação. A produção relativa dos conídios por biomassa de fungo foi muito variável, de 0,5 a 16 conídios por centigrama de micélio, não sendo considerada um critério adequado para escolher o meio de cultura. Com base nos presentes resultados, um meio à base de extrato de batata ou fatias de batata enriquecidas poderiam ser usados para a produção experimental e, eventualmente, massal de N. rileyi. Dadas as similaridades entre exigências térmicas in vitro e in vivo aqui descritas, as características térmicas da micose poderiam ser simplesmente estimadas com base na temperatura ambiente.