Glucosa-6-fosfatasa de envoltura nuclear de hígado de rata / Glucose-6-phosphatase from nuclear envelope in rat liver

RESUMEN

Se comparó la actividad de la glucosa-6-fosfatasa (G-6-Pasa) de envoltura nuclear (EN) con la microsomal. Los microsomas intactos fueron incapaces de hidrolizar manosa-6-fosfato (M-6-P); por el contrario, la EN intacta fue capaz de hidrolizar dicho substrato. La galactosa-6-fosfato mostró ser un buen substrato tanto para la enzima de EN como microsomal, con una latencia similar a la obtenida para M-6-P utilizando microsomas, por lo cual galactosa-6-fosfato fue usado para medir el porcentaje de EN intactas. Los parámetros cinéticos (Kii y Kis) de la inhibición por floricina de la G-6-Pasa de EN intactas, utilizando glucosa-6-fosfato (G-6-P) y M-6-P como substrato, fueron aproximadamente iguales. El transportador T1 de EN fue más sensible a la amiloride que el microsomal. Por el contrario, el sistema microsomal fue más sensible al efecto de N-etilmaleimida (NEM) que el de EN y este último, fue prácticamente insensible a los inhibidores de transporte aniónico DIDS y SITS, los cuales afectan fuertemente la enzima microsomal. Los resultados anteriores permiten sugerir que en la EN existe un transportador de hexosas-6-fosfato, capaz de transportar G-6-P y M-6-P y quizás otras hexosas-6-fosfato y que, o es diferente al T1 microsomal, o si es igual es influenciado por las características del sistema membranoso en el cual está incluido. La capacidad superior de hidrólisis de PPi de la G-6-Pasa de EN intacta, en comparación con la de microsomas intactos, sugiere diferencias en el transportador de Pi/PPi (T2) de ambos sistemas. La menor sensibilidad de la G-6-Pasa de EN al NEM sugiere que la subunidad catalítica de este sistema también podría tener algunas diferencias con la isoforma microsomal.