Desenvolvimento do UMELISA-TSH neonatal para dosagem de TSH em sangue coletado em papel filtro / Development of the ultramicroelisa for determination of neonatal TSH from blood spots on filter paper

RESUMO

O hipotireoidismo congênito, causado pela ausência anatômica ou funcional da glândula tireóide, apresenta freqüência mundial de aproximadamente 14000 recém-nascidos. A principal implicação da doença, o retardo mental, somente pode ser evitada se o tratamento se iniciar nas primeiras semanas de vida. Por isso, o diagnóstico precoce constitui a chave de êxito no tratamento da enfermidade. O Umelisa – TSH neonatal é um ensaio heterogêneo imunoenziomático tipo sanduíche, cuja fase sólida são micropoços de 10mL em tiras/placas pré-sensibilizadas com anticorpos policlonais anticadeia Beta do TSH. As amostras de sangue são eluídas com um conjugado anti_TSH policlonal/fosfatase alcalina e transferidas para placas de reação. A reação é revelada com substrato fluorigênico e a intensidade da fluorescência emitida é proporcional à concentração de TSH presente na amostra. A leitura é realizada automaticamente por um leitor fluorímetro-fotômetro computadorizado. A curva padrão validada contra ao padrão 80 558 da OMS varia dentro de uma faixa de 10-200 µUI/L, com limite de detecção de 2 µUI/L. Posteriormente, a curva foi ajustada para medir valores a partir de 0,1 µUI/L. A avaliação analítica mostrou uma precisão intra e inter-ensaio no ponto de corte (25 µUI/L) de 6,2 e 7,4 por cento, respectivamente. A correlação entre o Umelisa – TSH neonatal e o Delfia neonatal TSH foi boa (r = 0,99), além de não ser detectadas interferências significativas com outros hormônios hipofisários e proteínas séricas. A recuperação do teste foi de 101,1 +/- 3,7 por cento. Na prova de paralelismo, as concentrações calculadas de 3 amostras, após a correção com o fator de diluição, foi de +/- 6,4 por cento da concentração original da amostra pura. O Umelisa- TSH neonatal mostrou-se um método rápido e sensível, podendo ser utilizado como uma opção para programas de rastreamento em massa, já que permite operar com grandes quantidades de amostras garantindo eficiência e custo compatível com a tabela de exames complementares do Sistema Único de Saúde (SUS).