Efeito de APRIL na migração de timócitos / Effect of APRIL in the migration of thymocytes

RESUMO

As proteínas da família do Fator de Necrose Tumoral (TNF) possuem papel importante na indução de processos biológicos como proliferação, diferenciação, sobrevivência e morte celular. APRIL (ligante indutor de proliferação) é uma citocina desta família que promove proliferação e sobrevivência tumoral, modulando, também, a atividade de linfócitos B, favorecendo a sobrevivência e produção de anticorpos. Por outro lado, seus efeitos em linfócitos T ainda não pouco conhecidos. APRIL interage com os receptores BCMA e TACI expressos em linfócitos. Além destes, APRIL pode ligar-se a proteoglicanas de heparan-sulfato (HSPG) nas superfícies celulares. Camundongos transgênicos para APRIL que expressam a proteína em excesso desenvolvem neoplasia associada às células B-1. Em análise preliminar por imunohistoquímica encontramos um aumento de células B220+ no timo destes animais comparado aos controles. O timo é o órgão linfóide primário onde ocorre a maturação de linfócitos T, processo altamente dependente da migração dos timócitos no microambiente tímico. Para isto, os timócitos interagem com células epiteliais tímicas (TEC) e com uma rede de matriz extracelular complexa, que apresenta entre outros componentes, fibronectina e laminina. No entanto, os efeitos de APRIL no timo ainda não são conhecidos. Neste sentido, nosso objetivo foi estudar o efeito de APRIL na migração de timócitos de camundongos normais através de ensaios de migração em câmaras de transwell. Inicialmente, investigamos o impacto de APRIL na sobrevivência e proliferação de timócitos, porém, não encontramos alterações após o tratamento in vitro com a proteína recombinante. Por outro lado, os ensaios de migração ex vivo revelaram que APRIL possui efeito quimiorrepulsor, provavelmente, em conseqüência da diminuição da adesão dos timócitos conforme análise do co-cultivo com linhagens de TEC. A modulação destes eventos não estava relacionada com alteração do perfil de expressão dos receptores para fibronectina e laminina (VLA-4/VLA-5 e VLA-6) nas subpopulações de timócitos. Além disso, o efeito quimiorrepulsor de APRIL foi potencializado por CXCL12 e laminina (mas não por fibronectina). E ainda, os timócitos, ao contrário das TEC, não expressam receptor TACI. No entanto, o pré tratamento com heparina bloqueia parcialmente o efeito de APRIL na migração dos timócitos, sugerindo que este seja mediado pela interação com HSPG. Assim, concluímos que APRIL estimule a migração de timócitos, e module negativamente a adesão celular, através da interação com HSPG.