Efeito antiinflamatório da ciclosporina a no modelo do lavado broncoalveolar, em camundongos sensibilizados / Anti-inflammatory effect of cyclosporine A in bronchoalveolar lavage model in sensitized mice

RESUMO

Neste estudo utilizou-se o modelo do lavado broncoalveolar ( LBA) induzido pela ova l bumina (OVA 25mg/Kg, s.c.). Neste protocolo experimental os camundongos receberam 1 h antes do desafio, solução de azul de Evans (25mg/Kg, i.v.) para quantificação do exsudato. Os objetivos deste trabalho foram 1) Caracterizar o modelo do LBA avaliando-se os leucócitos e a exsudação no fluido broncoalveolar e em tecidos e 2) Avaliar os e feitos da ciclosporina A (CLP) sobre os parâmetros inflamatórios estudados. Camundongos albinos Suíços receberam OVA ( 50μg+0,8mg Al(OH)3 + 0,4mL NaCl 0,9 por cento, s.c.) por 21 dias. A última dose (desafio) foi de 50μg/mL, s.c.. O grupo-controle recebeu 0,1 de mL NaCl 0,9 por cento estéril, s.c.. Em outros experimentos, diferentes grupos de animais foram tratados com CLP (10 mg/Kg, i.p.) 0,5 h antes do desafio. Os parâmetros inflamatórios foram avaliados 24 h após o desafio. Os resultados obtidos foram expressos em média ± E.P.M.. As diferenças estatísticas foram determinadas pela análise de variância (ANOVA) e complementados com os testes de Dunnet ou teste “t” de student. Valores de P < 0,05 foram considerados significantes. Nos animais tratados com OVA observou-se aumento dos leucócitos, às custas de mononucleares, e exsudação (P < 0,05). A ciclosporina A inibiu o influxo de leucócitos, às custas de mononucleares, no LBA (P < 0,05) e aumentou a exsudação no rim e no baço (P < 0,01). O modelo do LBA, induzido pela OVA, é um modelo de resposta inflamatória aguda com aumento de leucócitos e exsudação. A ciclosporina A demonstrou efeito antiinflamatório inibindo o influxo de leucócitos no LBA.

ABSTRACT

In this study we used the bronchoalveolar lavage (BAL) model, of sensitized mice with ovalbumin (25mg/Kg, s.c.). To ana -lyze the exudation 1 h before challenge the animals received 0.2 ml of Evans blue dye (25mg/kg, i.v.). The aim of this study were 1) To characterize the BAL model evaluating the leukocyte and exudationin the BAL and tissues, and 2) To analyze the effect of cyclosporine A (CLP) on the inflammatory parameters described before. The Swiss mice received OVA (50μg + 0,8mg Al(OH)3 + 0,4mL NaCl0.9 percent, s.c.) for 21 days. The last dose (challenge) of OVA was 50μg/mL s.c. The control-group received 0.1mL of sterile saline (NaCl 0.9 percent, s.c.). In another set of experiments, different groups of animals received CLP (10mg/Kg, i.p.) 0,5h before challenge. The inflammatory parameters were analyzed 24h after challenge. The results were expressed by mean ± S.E.M.. The statistical differences between groups were determined by analysis of variance (ANOVA) and complemented with Dunnett or student t tests. Values of P<0.05 were considered significant. In OVA-treated animals (25mg/Kg, s.c.) we observed a significant increase of leukocytes influx, due to mononuclear migration, as well as exudation (P<0.01). The cyclosporine A (CLP) 10mg/Kg, i.p, inhibited the leukocyte influx, due to mononuclear (P<0.05) and a significant increase of exudation in the BAL and organs (kidney and spleen) (P<0.05). The BAL model induced by OVA promotes an acute inflammatory response with significant in crease of leukocytes and exudation. CLP had important anti-inflammatory proprieties, inhibiting priory leukocyte migration into the BAL.