Ativação linfocitária e apoptose em linfonodos de camundongos BALB/C tratados com lectinas / Lymphocite activation and apoptosis in lymph nodes of lectin treated BALB/C mice

RESUMO

Lectinas são proteínas de origem não imune que reconhecem de forma específica resíduos de carboidrato. A sua ligação a receptores na superficie celular geralmente tem efeito estimulatório, e em alguns sistemas, tanto in vitro como in vivo, a estimulação intensa promovida por estas moléculas está associada à apoptose. Neste trabalho avaliou-se a capacidade estimulatória in vivo de três lectinas brasileiras da subtribo Diocleinae, extraídas de Canavalia brasiliensis (ConBr), Dioclea violacea (DVioL) e Dioclea grandiflora (DGL), com elevada capacidade estimulatória in vitro sobre linfócitos humanos. Camundongos BALB/c com 8-1 5 semanas foram injetados subcutaneamente no coxim da pata posterior esquerda com ConBr, DGL ou DVioL em salina tamponada com fosfato (PBS). Como controle a pata contralateral foi injetada com a salina. Os linfonodos poplíteos dos animais foram excisados após 1 5 h e analisados segundo diversos parâmetros. O número de células presentes nos linfonodos estimulados foi significativamente maior do que nos linfonodos não estimulados. As lectinas promoveram aumento significativo na capacidade proliferativa espontânea ex vivo das células do linfonodo. avaliada através de cultivo por 24 h. Houve aumento significativo também na expressão de receptor para interleucina 2, um marcador que reflete ativação de células T. A histologia evidenciou grande expansão das áreas T, que nos linfonodos estimulados apresenta numerosos linfoblastos e figuras de apoptose (confirmadas por microscopia eletrônica). A imunohistoquímica para o PCNA, um antígeno nuclear cuja expressão está relacionada ao processo de divisão celular, revelou grande número de células em proliferação também nas áreas T. A distribuição dos focos de apoptose foi visualizada através da técnica de TUNEL. Os focos apresentaram-se menos numerosos e restritos à região subcapsular nos linfonodos estimulados com C onBr. em quantidade intermediária e distribuídos pela região subcapsular nos linfonodos estimulados com DGL e mais abundantes e melhor distribuídos nos linfonodos injetados com DVioL. Os linfonodos estimulados apresentaram ainda infiltrado inflamatório de intensidade maior nos linfonodos estimulados com DVioL, intermediária nos estimulados com DGL e de menor intensidade naqueles estimulados com ConBr. Esta inflamação estava frequentemente associada à necrose de vênulas do endotélio alto nos linfonodos estimulados com DVioL; ocasionalmente este fenômeno foi observado também por estimulação com DGL. [ Os dados sugerem a.ocorrência de um espectro de respostas (compreendendo intensa proliferação celular, o acúmulo de células ativadas e o desencadeamento de apoptose, associados ao progressivo depósito destas moléculas nos linfonodos), cuja cinética de desenvolvimento difere ligeiramente entre as lectinas estudadas.