Estudo preliminar da influência do laser de baixa intensidade (GaAlAs) na proliferação de células derivadas de polpa dental decídua humana / Preliminary analysis of the influence of low intensity laser (GaAlAs) in proliferation of human deciduous dental pulp derived cells

RESUMO

O objetivo deste trabalho foi verificar in vitro a influência da fototerapia a laser na biomodulação da proliferação de células derivadas de polpa dental decídua humana. Células derivadas de polpa dental decídua humana (densidade = 8,5x103 células/cm2, passagem 13) foram divididas em dois grupos experimentais: Laser (irradiação diária de laser de GaAlAs na dose de 2,5 J/cm2) e Controle (sem irradiação). O ensaio de proliferação multiparamétrico foi realizado com três técnicas consecutivas de avaliação da viabilidade celular: XTT (atividade mitocondrial), vermelho neutro (integridade lisossomal) e cristal violeta (inclusão em DNA), nos períodos de 12 horas, 1, 3, 5 e 7 dias. Os resultados mostraram aumento significativo (p < 0,001) da redução de XTT no grupo Laser (0,929 ± 0,224) em comparação com o grupo Controle (0,495 ± 0,204) em 7 dias; pico máximo da captação de vermelho neutro no grupo Controle aos 3 dias (p < 0,05) e do grupo Laser em 5 dias; a proliferação celular foi constante e progressiva até o período de 7 dias, semelhante em ambos os grupos. Considerando os resultados obtidos concluiu-se que o laser de baixa intensidade biomodula positivamente a atividade mitocondrial de células derivadas de polpa dental decídua humana, porém sem afetar a taxa de proliferação celular.

ABSTRACT

The aim of this study was to evaluate, in vitro, the influence of laser phototherapy in biomodulation of proliferation for human deciduous dental pulp derived cells. Human deciduous dental pulp derived cells (density = 8,5x103 cells/cm2, passage 13) were separated in two experimental groups: Laser (daily GaAlAs laser irradiation with a 2,5 J/cm2 dose) and Control (without irradiation). The multiparametric proliferation assay was effectuated with three successive techniques for cell viability evaluation: XTT (mitochondrial activity), neutral red (lisossome integrity) and crystal violet (DNA inclusion), during 12 hours, 1, 3, 5 and 7 days. Our results showed a significant increase of mean absorbance of XTT of Laser (0.929 ± 0.224) in comparison with Control (0.495 ± 0.204) in 7 days; maximal uptake of neutral red at 3 days (p < 0.05) for Control and 5 days for Laser group; a constant and progressive cell growth up to 7 days, similar in both groups. On the basis of these findings, it is possible to conclude that the low intensity laser biomodulates positively the mitochondrial activity of human deciduous dental pulp derived cells without, however, significant effects on cell proliferation rates.