Febre maculosa brasileira: avaliação comparativa das metodologias de imunofluorescência indireta (IFI) e reação em cadeia pela polimerase (PCR) em amostras de pacientes provenientes de áreas endêmicas do Estado de São Paulo / Brazilian spotted fever: comparative evaluation of indirect immunofluorescence assay (IFA) and polymerase chain reaction (PCR) methology in human serum samples from endemic areas of São Paulo State

RESUMO

As aplicações da reação em cadeia pela polimerase (Nested PCR) foram avaliadas em comparação com a pesquisa de anticorpos e isolamento bacteriano, para o diagnóstico de casos fatais com suspeita de riquetsioses do Grupo da Febre Maculosa (GFM) em amostras de soro. A PCR foi baseada na especificidade dos iniciadores derivados de uma região gênica conservada que codifica um antígeno de 17-kDa (htrA). Amostras de soro de 50 casos fatais suspeitos de riquetsioses do GFM foram testadas através da Imunofluorescência Indireta (IFI) para pesquisa de IgG e IgM e Nested PCR após extração do DNA com kit específico para extração de soro. O isolamento bacteriano foi realizado quando foram encaminhadas amostras adequadas para o exame. O fragmento específico de riquétsias GFM foi detectado em 40% (20/50) dos soros testados em comparação com 22% (11/50) detectados pelos métodos sorologia e isolamento bacteriano. Os produtos amplificados foram confirmados pela análise do sequenciamento de fragmentos de DNA apresentando 100% de identidade com R. rickettsii e com Grupo da Febre Maculosa. Os resultados obtidos indicam que a utilização da Nested PCR em amostras de soro aumenta a sensibilidade para o diagnóstico da FM em casos fatais com suspeita clínica da doença, sendo indicada sua aplicação em complemento à sorologia e ao isolamento.