Culture supernatants from V. cholerae O1 ElTor strains isolated from different geographic areas induce cell vacuolation and cytotoxicity / Cepas de V. cholerae O1 biotipo ElTor aisladas de diferente origen geográfico inducen vacuolización celular y citotoxicidad
Salud pública Méx
;
51(1): 39-47, ene.-feb. 2009. ilus, graf, tab
Artículo
en Inglés
| LILACS
| ID: lil-572704
ABSTRACT
OBJECTIVE:
To investigate whether the HlyA-induced vacuolating effect is produced by V. cholerae O1 ElTor strains isolated from different geographic origins, including Mexico. MATERIAL ANDMETHODS:
Supernatant-induced haemolysis, vacuolating activity and cytotoxicity in Vero cells were recorded. PCR, RFLP analysis and molecular cloning were performed.RESULTS:
All ElTor strains analyzed induced cellular vacuolation. Ribotype 2 strains isolates from the U.S. gulf coast yielded the highest titer of vacuolating activity. Eight of nine strains were haemolytic, while all strains were PCR positive for the hlyA gene. We cloned the hlyA gene from two ElTor strains, a toxigenic (2514-88, ctxAB+) and a non-toxigenic Mexican strain (CM 91-3, ctxAB-). Supernatant from those recombinant E. coli strains induced haemolysis, cell vacuolation and cytotoxicity. RFLP-PCR analysis revealed similarities in the hlyA gene from all strains tested.CONCLUSION:
The HlyA-induced vacuolating effect is a widespread phenotype of epidemic V. cholerae O1 ElTor strains.RESUMEN
OBJETIVO:
Analizar el efecto vacuolizante de cepas de V. cholerae O1 ElTor aisladas de diferente origen geográfico, incluyendo México. MATERIAL YMÉTODOS:
Se realizaron pruebas de hemolisis, vacuolización y citotoxicidad en células Vero, así como PCR, análisis por RFLP y clonación molecular.RESULTADOS:
Todas las cepas indujeron el efecto vacuolizante. Las cepas del ribotipo 2, aisladas de las costas del Golfo en Estados Unidos, presentaron títulos altos de vacuolización. El gen hlyA fue amplificado en las nueve cepas mediante PCR, aunque sólo ocho fueron hemolíticas. Se clonó el gen hlyA de una cepa toxigénica (2514-88, ctxAB+) y de una cepa no toxigénica aislada en México (CM 91-3, ctxAB-). El sobrenadante de las clonas recombinantes indujo hemólisis, efecto vacuolizante y citotoxicidad. El RFLP mostró alta similitud del gen hlyA de las cepas estudiadas.CONCLUSIÓN:
El efecto vacuolizante es un fenotipo ampliamente distribuido en cepas epidémicas de V. cholerae O1 biotipo ElTor.
Texto completo:
Disponible
Índice:
LILACS (Américas)
Asunto principal:
Proteínas Bacterianas
/
Células Vero
/
Cólera
/
Medios de Cultivo Condicionados
/
Vibrio cholerae O1
/
Proteínas Hemolisinas
Límite:
Animales
País/Región como asunto:
America del Norte
/
Europa
/
Oceanía
Idioma:
Inglés
Revista:
Salud pública Méx
Asunto de la revista:
Salud Pública
Año:
2009
Tipo del documento:
Artículo
País de afiliación:
México
/
Estados Unidos
Institución/País de afiliación:
Centro de Investigación y de Estudios Avanzados del Instituto Politécnico Nacional/MX
/
University of Pittsburgh School of Medicine/US
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