Determinación de ocratoxina-a por HPLC con detección por fluorescencia (HPLC-FL): un nuevo método estandarizado para muestras de trigo / Ochratoxin-a determination by HPLC with fluorescence detection(HPLC-FL): a new standardization method for wheat samples

RESUMEN

El objetivo principal de este estudio fue evaluar la presencia de Ocratoxina-A (OTA) en los granos del trigo y harina del trigo realizadas por un nuevo método de determinación que usa la cromatografía líquida de alta resolución (CLAR) acoplada al descubridor delfluorimetrio. El experimento usó seis muestras de grano de trigo del lugar del almacenamiento diferente a la industria local de Chapeco (SC), Brasil Sur, en agosto, 2008. El extracto de OTA era llevado a cabo usando el acetonitrila agua (12080 vlv) como solventes. Después el suprenadante fue filtrado, y aplicado en la columna del inmunoafinidad específica a OTA. Además, la columna se lavó con agua y la toxina era el eluido con el metanol. La determinación del OTA se realizó por detección de fluorescencia acoplado al aparato de HPLC. Los volúmenes de OTA en los granos del trigo y harina del trigo eran entonces los determínate y los resultados mostraron una concentración de OTA menor que los límites exigidos por la legislación internacional.

ABSTRACT

The main objective of this study was to evaluate the presence of Ochratoxin A (OTA) in wheat grains and wheat flour samples using a new high performance liquid chromatography (HPLC) method. The experiment used six wheat grain samples from different industry storage place from Chapeco (SC), South Brazil, on August 2008. The OTA extraction was carried out using acetonitrile water (12080 v/v) as solvent. Thereafter, the supernatant was filtered, and applied on OTA-specific immunoafinity column to HPLC Furthermore, the column was washed with water and the toxin was eluted with methanol. The OTA wheat grains and wheat flour concentration were analyzed by a fluorescence detector coupled to the HPLC apparatus. The results showed a smaller OTA concentration than the limits set by international legislation.