Estudo in vivo da ação do tratamento endodôntico sobre endotoxinas bacterianas em canais radiculares com polpa necrosada e avaliação dos efeitos citotóxicos / In vivo action of endodontic treatment on bacterial endotoxins in necrotic root canals and evaluation of cytokines

RESUMO

Em canais radiculares com polpa necrosada, a infecção é causada por diferentes bactérias, principalmente Gram-negativas anaeróbias facultativas e estritas, que, consequentemente, liberam diferentes endotoxinas durante sua duplicação ou morte celular. Os objetivos deste estudo foram a) avaliar in vivo as quantidades de endotoxinas em canais radiculares com polpa necrosada, antes da realização do tratamento endodôntico; b) avaliar a efetividade do preparo biomecânico utilizando diferentes associações de agentes irrigantes [hipoclorito de sódio (NaOCl)2,5%; NaOCl 2,5% + hidróxido de cálcio 0,14% e NaOCl 2,5% +polimixina B] sobre endotoxinas em canais radiculares; c) avaliar a ação da medicação intracanal (clorexidina gel 2% + hidróxido de cálcio) sobre endotoxinas; d) avaliar, durante todo o tratamento endodôntico, a produção de citocinas por macrófagos estimulados pelas amostras coletadas dos canais radiculares. Foram selecionados 33 dentes com necrose pulpar e lesão periapical visível radiograficamente e,imediatamente após o isolamento absoluto e acesso ao canal radicular foi realizada a primeira coleta. Os terços cervical e médio dos canais foram preparados com instrumentação oscilatória utilizando-se como solução irrigadora o hipoclorito de sódio 2,5% e para o preparo manual do terço apical os canais foram divididos em 3 grupos (n=11) G1) NaOCl 2,5%;G2) NaOCl 2,5% + água de cal (0,14%); G3) NaOCl 2,5% + polimixina B. Após o preparo biomecânico foi realizada a segunda coleta e, após a aplicação do EDTA, a terceira coleta. A quarta coleta foi realizada após 14dias de medicação intracanal com pasta de clorexidina gel 2% + hidróxidode cálcio. Para todas as coletas foi realizada a quantificação de endotoxinas pelo teste cinético cromogênico do lisado de amebócitos de Limulus (LAL) e avaliação dos efeitos citotóxicos pela produção de citocinas (IL-1, TNF-) em cultura de macrófagos. Para a quantificação de endotoxinas...

ABSTRACT

In radicular canals with necrotic pulp, infection is caused by several bacterium, mainly by the facultative anaerobic and strict Gram-negative,which, after wards, release various endotoxins through out its duplication or cellular death. This analysis aims at a) evaluate in vivo the endotoxina mount in radicular canals with necrotic pulp, prior to endodontic treatment; b) evaluate the effects of biomechanical preparation using various associations of irrigating agents (sodium hypochlorite 2.5% +polymyxin B; sodium hypochlorite 2.5% + calcium hydroxide (0.14%) and sodium hypochlorite 2.5% on endotoxins in radicular canals; c)evaluate the intracanal gauge (2% chlorhexidine gel + calcium hydroxide) on endotoxins; d)evaluate, through out the entire endodontic treatment, the macrophages cytokine out put stimulated by the collected samples inradicular canals. 33 teeth, from various patients with necrotic pulp and periapical lesion visible on x-ray, were selected. The first sampling was performed immediately after the complete isolation and access into radicular canal. The cervical e medium thirds of the canals were preparedby using sodium hypochlorite 2.5% irrigating solution, and for the manual preparation of the apical third, the canals were divided into 3 groups(n=11) G1) sodium hypochlorite 2.5%; G2) sodium hypochlorite 2.5% +lime water (0.14%); G3) sodium hypochlorite 2.5% + polymyxin B. These cond sampling was performed after the biomechanical preparation, and the third was performed 3 minutes after the EDTA was applied. The fourth sampling was performed after 14 days on intracanal medication of chlorhexidine gel 2% paste + calcium hydroxide. To all the samplings,endotoxin quantification was performed, using the Limulus amebocytelysate (LAL) chromogenic kinetic test, and evaluating citotoxic effects dueto the production of cytokines (IL-1, TNF-) in macrophage cultures. A significant estatistical difference...