Effects of extracts, flavonoids and iridoids from Penstemon gentianoides (Plantaginaceae) on inhibition of inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2) in LPS-Activated RAW 264.7 macrophage cells and their antioxidant activity / Efectos de extractos, flavonoides e iridoides de Penstemon gentianoides (Plantaginaceae) sobre la inhibición de oxido nitrico sintasa inducible (iNOS), ciclooxigenasa-2 (COX-2) celulas de macrofagos murinos RAW 264.7 activadas con LPS y sus actividades antioxidantes

ABSTRACT

Penstemon gentianoides (HBK) (Kunth) Poir (Plantaginaceae) is an evergreen shrub that grows the throughout high mountains from Guatemala, Mexico and Southern states of US. Its leaves and roots have been used therapeutically for inflammation-related conditions from Aztec times, but systematic studies of its anti-inflammatory activity are lacking and no specific active components have been identified. In this study, methanol, n-hexane, CH2Cl2, ethyl acetate and methanol/water (6:4) extracts, luteolin, diosmetin, verbascoside, martynoside, pensteminoside, globularisicin and plantarenaloside isolated from this plant were evaluated by determining their inhibitory effects on the production of proinflammatory mediators in lipopolysaccharide (LPS)-activated RAW 264.7 murine macrophage cells. Ethyl acetate extract, luteolin, and diosmetin exhibited potent anti-inflammatory and antioxidant activities. The results indicated that luteolin and diosmetin suppressed the LPS induced production of nitric oxide (NO), through the down-regulation of inducible nitric oxide synthases (iNOS) and cyclo-oxygenase 2 (COX-2) protein expressions and showed a potent antioxidant activity against DPPH, TBARS and DCFH. The inhibition of enzymes and NO production by selected extracts and compounds was dose-dependent with significant effects seen at concentration as low as 50 ìM. Thus, luteolin and diosmetin may provide a potential therapeutic approach for inflammation associated disorders.

RESUMEN

Penstemon gentianoides (HBK) (Kunth) Poir (Plantaginaceae) es un arbusto perenne que crece a lo largo de las montañas altas de Guatemala, México y los estados del sur de los EE.UU.. Sus hojas y raíces se han utilizado terapéuticamente para afecciones relacionadas con inflamación desde la época de los aztecas, pero no existen estudios sistemáticos de su actividad anti-inflamatoria y ninguno de los metabolitos activos específicos han sido identificados. En este estudio, los extractos de metanol, n-hexano, CH2Cl2, acetato de etilo y metanol/agua (6:4), junto con, luteolina, diosmetina, verbascósido, martynoside, pensteminoside, globularisicin y plantarenaloside, aislados desde esta planta se evaluaron mediante la determinación de sus efectos inhibitorios sobre la producción de mediadores proinflamatorios en macrófagos murinos activados con lipopolisacárido (LPS)-RAW 264,7. El extracto de acetato de etilo, luteolina y diosmetina exhibieron una potente actividad anti-inflamatoria y antioxidante. Los resultados indican que luteolina y diosmetina suprimen la producción de óxido nítrico (NO), a través de la regulación de óxido nítrico sintasa-inducible (iNOS) y la ciclooxigenasa-2 (COX-2) ambas expresiones de proteínas. Ademas mostró una potente actividad antioxidante contra DPPH, TBARS y DCFH. La inhibición de las enzimas y la producción de NO por los extractos seleccionados y compuestos es dependiente de la dosis con efectos significativos visto en una concentración tan baja como 50 mM. Por lo tanto, luteolina y diosmetina puede proporcionar un enfoque terapéutico potencial para transtornos asociados a los procesos de inflamación.