First environmental isolation of Cryptococcus gattii serotype B, from Cúcuta, Colombia / Primer aislamiento ambiental de Cryptococcus gattii de serotipo B, en Cúcuta, Colombia

ABSTRACT

Introduction. In Cúcuta, Cryptococcus gattii serotype B is commonly recovered from immunocompetent patients with cryptococcosis, but it has not been recovered from the environment in spite of its high incidence which is 77% out of reported cases. Objective. The aim of this work was to carry out an extensive environmental sampling in Cúcuta, in an attempt to isolate C. gattii serotype B and to expand our knowledge about the ecology and epidemiology of this important yeast. Materials and methods. Samples associated with 3,634 trees from 40 zones of Cúcuta were collected and processed with 28 samples collected near the houses of four patients with cryptococcosis caused by C. gattii serotype B. The serotype of the recovered isolates was done using multiplex PCR, molecular patterns were determined by RFLP of the URA5 gene and mating type was determined using the primers MfαU, MfαL, MFa2U and MFa2L. Results. In total, 4,389 samples were processed and one isolate of C. gattii serotype B (VGI/a), two isolates of C. gattii serotype C (VGIII/α) and three isolates of C. neoformans var. grubii, serotype A (VNI/α), were recovered. The density of the recovered isolates varied from 50 to 350 cfu/g of soil. Conclusions. This is the first report on the environmental isolation of C. gattii serotype B from Cúcuta. However, because of the low rate of recovery of isolates from soil only, the environmental niche of C. gattii has not been established and further environmental studies in Cúcuta are necessary, owing that this serotype is not only causing cryptococcosis but also has shown a higher virulence after the Vancouver outbreak.

RESUMEN

Introducción. En Cúcuta, Cryptococcus gattii de serotipo B se recupera comúnmente de pacientes inmunocompetentes con criptococosis, pero no ha sido recuperado del ambiente a pesar su alta incidencia, que es de 77 % de los casos reportados. Objetivo. El objetivo de este trabajo fue realizar un extenso muestreo ambiental en Cúcuta, para aislar C. gattii de serotipo B y expandir nuestro conocimiento sobre la ecología y la epidemiología de esta importante levadura. Materiales y métodos. Se recolectaron y se procesaron muestras asociadas con 3.634 árboles de 40 zonas de Cúcuta y 28 muestras cercanas a las casas de cuatro pacientes con criptococosis causada por C. gattii de serotipo B. El serotipo de los aislamientos recuperados se estableció usando PCR múltiple, el patrón molecular se determinó por RFLP del gen URA5 y la pareja sexual se determinó usando los iniciadores MfαU, MfαL, MFa2U y MFa2L. Resultados. Se procesaron 4.389 muestras y se recuperó un aislamiento de C. gattii de serotipo B (VGI/a), dos aislamientos de C. gattii de serotipo C (VGIII/α) y tres aislamientos de C. neoformans var. grubii de serotipo A (VNI/α). La densidad de los aislamientos recuperados varió entre 50 y 350 UFC/g de suelo. Conclusiones. Éste es el primer reporte de la recuperación ambiental de C. gattii de serotipo B en Cúcuta. Sin embargo, por la baja tasa de recuperación de aislamientos únicamente en suelo, el nicho ambiental de C. gattii no se pudo establecer, por lo que es necesario realizar posteriores estudios ambientales en Cúcuta, debido a que este serotipo, no sólo está causando criptococosis, sino también muestra una gran virulencia después del brote ocurrido en Vancouver.