Determinación del potencial de membrana en el espermatozoide humano eyaculado / Membrana potential determination in human eyaculated spermatozoa

RESUMEN

La acumulación del catión lipofílico radiactivo trifenilmetilfosfonio (TPMP+), en el espermatozoide es utilizado para cuantificar el potencial electrostático a través de la membrana. Los espermatozoides lavados fueron resuspendidos e incubados en un medio conteniendo la concentración de K+ baja elevada, hasta que el catíon logra el estado de equilibrio (20 minutos a 37-C). Cuando la concentración de K+ es baja en el medio de incubación el membrana es -69 ñ 2 mV, y cuando la concentración externa de K+ fue incrementada, la membrana del espermatozoide se despolariza, disminuyendo el membrana hasta en 80%. La acumulación del catión fue modificada en presencia de varios agentes, los cuales afectan a los gradientes iónicos a través de la membrana plasmática. La adición valinomicina al medio de incubación incrementa en le membrana en el espermatozoide a -82.8 ñ 2 mV; con Ca++ se logra un efecto similar. La ATPasaNa+-K+ parece jugar un papel importante en el membrana del espermatozoide. En presencia de ouabaina un inhibidor de la ATPasa Na+-K+ disminuye el membrana en un 40%. Por otro lado, al inhibir la ATPasa mitoconfrial, por el desacoplante de la fosforilación oxidativa 2, 4 dinitrofenol, el membrana disminuye hasta en 50%. Por último, la acumulación de TPMP+ es tiempo, temperatura, pH y sustrato-dependiente, y es linear en relación al número de espermatozoides