Nested PCR reveals elevated over-diagnosis of E. histolytica in Barcelona, Venezuela / Nested PCR revela elevado sobrediagnóstico de E. histolytica en Barcelona, Venezuela

ABSTRACT

The aim of this study was to identify the presence of Entamoeba histolytica and E. dispar by nested PCR in children attending the “Dr. Luis Razetti” Hospital, Barcelona, Anzoátegui State. Of the 1,141 fecal samples coproparasitologically evaluated by conventional microscopy, 150 were diagnosed positive for E. histolytica in 0-10 year-old-children, of both sexes. The signs, symptoms and a full coproparasitological report were obtained from all of these and nested PCR was performed to identify E. histolytica and E. dispar. The conventional microscopy results showed a diagnostic frequency of E. histolytica in 13.2% of the cases, of which 79.3% were positive only for this pathogen. However, nested PCR showed that of these, only 28% (42/150) were actually infected by Entamoeba spp., revealing a high over-diagnosis of E. histolytica. We also identified 9.3% E. histolytica, 4% E. dispar and 4.7% mixed infections. Diarrhea was the most common symptom, followed by abdominal pain and fever. Bloody stools were statistically associated with E. histolytica, but were also found for E. dispar infections. This study demonstrates that molecular techniques complementary to conventional methods enable the correct identification of Entamoeba spp., thus contributing to an improved epidemiological assessment of these parasites and implementation of the appropriate treatment.

RESUMEN

Esta investigación planteó detectar por nested PCR Entamoeba histolytica y E. dispar en niños del Hospital “Dr. Luis Razetti” de Barcelona, estado Anzoátegui y su asociación con síntomas clínicos. De 1.141 muestras fecales evaluadas parasitológicamente por microscopía convencional, 150 fueron positivas a E. histolytica en niños de 0-10 años y de ambos sexos. Se obtuvo información de signos, síntomas y reporte parasitólogico completo de cada uno de los pacientes y se realizó nested PCR para identificar E. histolytica y E. dispar. Los resultados de la microscopía convencional demostraron una frecuencia de diagnóstico de E. histolytica del 13,2%. En el 79,3% de estas positivas se reportó esta especie como único patógeno. Sin embargo, la nested PCR evidenció que sólo 28,0% (42/150) de las mismas presentaron infecciones por Entamoeba, evidenciándose un elevado sobrediagnóstico de E. histolytica. Además se identificaron 9,3% infecciones por E. histolytica, 4,0% E. dispar, y 4,7%infecciones mixtas. La diarrea fue el síntoma más común, seguido de dolor abdominal y fiebre. La presencia de sangre demostró asociación estadísticamente significativa con E. histolytica, pero también se reportó en infecciones por E. dispar. Este estudio demuestra que las técnicas moleculares complementarias a los métodos convencionales, permiten la identificación correcta de especies de Entamoeba, contribuyendo con una mejor evaluación epidemiológica de estos parásitos y la aplicación adecuada del tratamiento.