Electroforesis en Gel de Campo Pulsado (PFGE) para la diferenciación molecular de Listeria monocytogenes / Pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) for the molecular differentiation of Listeria monocytogenes

RESUMEN

En Colombia no es obligatoria la notificación deL. monocytogenes en alimentos, pero se vigilan los alimentos dealto riesgo. Clínicamente se reportan como microorganismoGram-positivo sólo cuando causan meningitis. L. monocytogeneses un patógeno intracelular, transmitido por alimentos, letalpara humanos y animales, que causa Listeriosis; enfermedadque genera varios brotes en el mundo, con pérdidashumanas y económicas. Pocos trabajos en Colombia hanlogrado identificar y serotipificar molecularmente losaislamientos, lo que sólo permite distribuir teóricamentelos serotipos en linajes. Esta revisión se limita a mostrarcaracterísticas del patógeno, su importancia en salud públicay en la industria de alimentos, generalidades de la PFGECHEF;identificando el protocolo estandarizado de trabajoy las enzimas de restricción adecuadas para cortar el ADN.Se encontró que la combinación de enzimas XbaI-AscI,seguida de ApaI es la que ofrece mejores resultados en ladiferenciación de los aislamientos; agrupándolos por linajes;mostrando variaciones intra-serotipo y que en varios paíseslatinoamericanos se analizan los resultados a través dePulseNet, lo que garantiza la comparación de los patronesde PFGE en igualdad de condiciones...

ABSTRACT

The reporting of L. monocytogenes in food in Colombia is not a mandatory; however, foods consideredhigh-risk are monitored, and the organism is only reported clinically as Gram-positive when it causesmeningitis. L. monocytogenes is a foodborne, intracellular, pathogen which causes listeriosis, a disease lethalto humans and animals. Outbreaks of this disease worldwide can bring about human and economiclosses. Only a few studies in Colombia have been able to identify and molecularly serotype isolatesallowing only the theoretical distribution of serotypes by lineage. This review explains the characteristicsof the pathogen, its importance in public health and in the food industry, and provides an overview ofPFGE-CHEF; identifying the standard work protocol and the appropriate restriction enzymes to cutDNA. We found that the enzyme combination, XbaI-AscI, followed by ApaI offers the best results todifferentiate isolates, by grouping them by lineages, and displaying intra-serotype variations. Additionally,we found that in several Latin American countries the results are analyzed using PulseNet; this ensuresthe comparison of PFGE patterns in equivalent conditions...

RESUMO

Na Colômbia não há uma notificação compulsóriade L. monocytogenes em alimentos, mas alimentos de altorisco são monitorados. Clinicamente, são relatados comoorganismos Gram-positivos apenas quando eles causammeningite. L. monocytogenes é um patógeno intracelularde origem alimentar, letal para seres humanos e animais,que causa a listeriose, que gera surtos em todo o mundo,com perdas humanas e econômicas. Poucos trabalhos naColômbia identificaram e sorotipificaram molecularmenteos isolados, que só permite a distribuição de sorotiposteoricamente em linhagens. Esta avaliação é limitada amostrar características do patógeno, sua importância nasaúde pública e na indústria de alimentos, e uma visãogeral do PFGE-CHEF; identificar o protocolo-padrão detrabalho e enzimas de restrição apropriadas para cortar oADN. Verificou-se que a combinação de enzimas XbaIAscI,seguido por ApaI representa a combinação de enzimasque ofereceu melhores resultados na diferenciação dosisolados, agrupando-a por linhagens, mostrando a variaçãointra-serotipo e que, em muitos países da América Latina,os resultados são analisados através PulseNet, que asseguraa comparação de padrões de PFGE em igualdade decondições...