Efeitos do laser e da terapia fotodinâmica no tratamento periodontal mecânico em ratas ovariectomizadas e sob influência sistêmica de nicotina: estudo histomorfométrico e imunoistoquímico / Effects of laser and photodynamic antimicrobial therapy in mechanical periodontal treatment in ovariectomized rats and under the influence of nicotine systemic: histomorphometric and immunohistochemistry

RESUMO

Este estudo avaliou histomorfometricamente, imunoistoquimicamente e pela reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa em tempo real (qRT-PCR) os efeitos da Terapia com Laser em Baixa Intensidade (LLLT) e da Terapia Fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) adjuvantes ao tratamento mecânico da periodontite experimental (PE) em ratas com deficiência de estrógeno e sob influência sistêmica da nicotina. Foram utilizadas 360 ratas, divididas em 4 grupos Grupo A (SH-vei) normais, Grupo B (SH-nic) - normais tratadas com nicotina, Grupo C (OVX-vei) - ovariectomizadas e Grupo D (OVX-nic) - ovariectomizadas tratadas com nicotina. A administração de nicotina foi iniciada nos animais do Grupo B (SH-nic) e Grupo D (OVX-nic) 30 dias antes da indução da PE. Os animais dos Grupos OVX-vei e OVX-nic foram submetidos à ovariectomia (OVX) bilateral 21 dias antes da PE realizada por adaptação de fio de algodão ao redor dos primeiros molares inferiores direitos e esquerdos. Após 7 dias, a ligadura foi removida e os animais subdivididos de acordo com os seguintes tratamentos locais realizados nos molares inferiores direitos e esquerdos RAR – Raspagem e alisamento radicular e irrigação com soro fisiológico; LLLT - RAR e irrigação com soro fisiológico associada à LLLT; aPDT- irrigação com azul de toluidina-O (TBO) e após 1 minuto, irradiação com laser em baixa intensidade. Foram eutanasiados 10 animais de cada subgrupo, aos 7, 15 e 30 dias após o tratamento local. A perda óssea (PO) na furca foi avaliada por meio de análises histomorfométrica e imunoistoquímica. A expressão gênica das citocinas TNF-α, IL-1β e IL-6 foram avaliadas pela qRT-PCR. Os dados foram submetidos à análise estatística (α = 5%). Os animais do Grupo OVX-nic apresentaram maior PO comparativamente ao grupo SH-vei (p<0,05). O tratamento local com aPDT reduziu a PO, diminuiu a expressão de RANKL e o número células TRAP-positivas e aumentou a expressão de OPG e o número de células PCNA-positivas. Os animais...

ABSTRACT

This study evaluated histomorphometrically, immunohistochemically and by polymerase chain reaction via real-time reverse transcriptase (qRT-PCR) the effects of Laser Therapy in Low Intensity (LLLT) and antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT) adjuncts to mechanical treatment of periodontitis experimental (PE) in rats with estrogen deficiency and under the influence of systemic nicotine. It was used 360 rats divided into 4 groups Group SH-veh sham treated with saline (vehicle); Group SH-nic sham treated with nicotine; Group OVX-veh ovariectomized treated with saline (vehicle) and Group OVX-nic ovariectomized treated with nicotine. Nicotine was administered to groups SH-nic and OVX-nic 30 days before the induction of PE. The animals in Groups OVX-veh and OVX-nic underwent ovariectomy (OVX) bilaterally 21 days before PE performed by adaptation of cotton thread around the first molars right and left. After 7 days, the ligature was removed and the animals divided according to the following local treatments performed in the right and left molars RAR - Scaling and root planing and irrigation with saline; LLLT - RAR and irrigation with saline associated with LLLT; aPDT - irrigation with toluidine blue O (TBO) and after 1 minute irradiation with LLLT. Ten animals were euthanized of each group at 7, 15 and 30 days after treatment site. Bone loss (BL) in the furcation was evaluated by histomorphometric and immunohistochemical analyzes. The gene expression of TNF-α, IL-1β and IL-6 were measured by qRT-PCR. Data were subjected to statistical analysis (α = 5%). The animals of the OVX-nic group showed higher BL group compared with SH-vei (p <0,05). Local treatment with aPDT showed BL reduced, decreased expression of RANKL and the number of TRAP-positive cells and increased the expression of OPG and the number of PCNA-positive cells. aPDT-treated animals showed reduced expression of TNF-α (7 days), IL-1β (7 and 30) and IL-6 (7 days) compared to the RAR inside SH-veh…