Ácido ascórbico intracelular diminui a indução à senescência celular, mas não a apoptose em fibroblastos expostos a concentrações subtóxicas de H2O2 / Intracellular ascorbic acid reduces the induction of cellular senescence, but not apoptosis in fibroblastos exposed to sub toxic concentrations of H2O2

RESUMO

Introdução: As espécies reativas de oxigênio (EROs) são produzidas durante o metabolismo normal das células, tendo funções fisiológicas, como a sinalização celular. Porém, em uma situação que leve o organismo à produção exagerada de EROs, temos o chamado estresse oxidativo, que tem ação deletéria às células, podendo levar a apoptose ou senescência celular. A vitamina C é um dos principais a gentes antioxidantes do organismo, atuando em todas as formas de estresse oxidativo. Método: Isolamento e cultivo de fibroblastos humanos dérmico em seis grupos controle, Vitamina C +, Vitamina C -, H2O2, Vitamina C + H2O2, Vitamina C - H2O2. Os fibroblastos foram submetidos ao estresse oxidativo pela suplementação de H2O2 ao meio de cultura por 2 horas. Foram avaliadas proliferação pelo MTT, senescência celular pela marcação da enzima beta-galoctosidase, apoptose celular e liberação de radicais livres por citometria de fluxo. Resultados: O peróxido de hidrogênio aumentou significantemente a senescência celular e a apoptose nos fibroblastos, enquanto a vitamina C diminuiu significantemente a indução a senescência celular somente no estado intracelular. Conclusões: O ácido ascórbico não protegeu os fibroblastos humanos dérmicos cultivados contra o estresse oxidativo induzido pelo H2O2. O ácido ascórbico intracelular levou à diminuição da indução à senescência celular.

ABSTRACT

Introduction: Reactive oxygen species (ROS) are produced during normal metabolism of cells, with physiological functions such as cell signaling. But in a situation that causes the body to ROS overproduction, we have the so-called oxidative stress, which has deleterious effects on cells, leading to apoptosis or cellular senescence. Vitamin C is one of the main antioxidants in the body, working in all forms of oxidative stress. Methods: Isolation and culture of human dermal fibroblasts in six groups control, + Vitamin C, - Vitamin C, H2O2, H2O2 + Vitamin C, H2O2 – Vitamin C. The fibroblasts were subjected to oxidative stress by supplements H2O2 to the culture medium for 2 hours. Were evaluated by MTT proliferation assay, cellular senescence by marking the enzyme beta-galactosidade, apoptosis and release of free radicals by flow cytometry. Results: Hydrogen peroxide significantly increased cellular senescence and apoptosis in fibroblasts, while vitamin C decreased significantly the induction of cellular senescence, just in the intracellular state. Conclusions: Ascorbic Acid did not protect cultured human dermal fibroblasts against oxidative stress induced by H2O2. Ascorbic acid has led to decreased intracellular induction of cellular senescence.