Comparative studies of Yersinia pestis outer membrane isolation techniques and their potential use in plague epidemiology

RESUMO

No presente estudo tres tecnicas para isolamento de fracoes enriquecidas em membrana externa de Y. pestis foram avaliadas. As tecnicas utilizadas foram centrifugacao em gradiente de densidade em sacarose e solubilizacao diferencial com Sarkosyl ou Triton X-100. A analise por eletroforese em gel de poliacrilamida na presenca de dodecil sulfato de sodio (SDS-PAGE) das membranas externas extraidas pelos diferentes metodos evidenciou perfis proteicos semelhantes. A determinacao das atividades de NADH-desidrogenase e succinato-desidrogenase (enzimas de membrana interna) indicou que todas as preparacoes estudadas eram adequadas a estudos analiticos. Obteve-se evidencias preliminares sobre o possivel uso de perfis proteicos de membrana externa na identificacao de variantes geograficos entre isolados selvagens de Y. pestis