Comparação entre os perfis de expressão de microRNAs em Linfomas de Hodgkin Clássico / Comparison between microRNA expression profiles in Classic Hodgkin Lymphoma

RESUMO

Introdução: Linfoma de Hodgkin (LH) é um dos linfomas mais frequentes no mundo ocidental, com cerca de 3 a 4 novos casos a cada 100 mil pessoas. Os microRNAs são pequenas moléculas que regulam a transcrição gênica e estão associadas ao desenvolvimento e progressão das neoplasias. Em LH clássico (LHC), alguns microRNAs já foram identificados a partir de células infectadas pelo EBV. Além destes, outros microRNAs já foram descritos em LHC, tanto em estudos onde foram realizadas esta avaliação em culturas celulares como utilizando a massa tumoral total de linfonodos, mas com pouca correlação com o comportamento biológico. Objetivo: O presente estudo tem como objetivo principal avaliar o perfil de expressão de microRNA em LHC, comparando casos livres de doença após a terapia com casos que exibiram recidivas. Material e métodos: Foram avaliados 106 pacientes com o diagnóstico de LHC, sendo coletados dados clínicos e avaliados os marcadores imuno-histoquímicos CD30, CD15, CD20 e CD15 destes casos, além da presença de EBV por CISH. Vinte casos foram selecionados para a avaliação da expressão de 377 microRNAs, 10 casos com recidiva e 10 casos sem evidência de doença. Como grupos comparadores, foram selecionadas 8 amostras de linfonodos reativos, 4 com hiperplasia folicular e 4 com hiperplasia paracortical. Os resultados do perfil de expressão foram submetidos ao método de agrupamento hierárquico não supervisionado. Resultados e discussão Os parâmetros clínico-patológicos desta coorte não diferiram daqueles encontrados na literatura. A sobrevida global e a sobrevida livre de progressão foram de 92,1% e 83,6% em 5 anos, respectivamente. Os fatores associados ao prognóstico em análise multivariada foram idade, níveis séricos de albumina e DHL e estadiamento. O perfil de expressão dos microRNAs de todos os casos de LHC possibilitaram a separação completa dos mesmos em relação aos linfonodos reativos, independentemente do tipo de hiperplasia. Na comparação entre os casos de LHC, foram identificados 3 microRNAs diferencialmente expressos miR-502-3p e miR-363, ambos hipoexpressos no grupo que continha todos os casos com recidivas e miR-886-5p, hiperexpresso neste grupo. Os dois primeiros microRNAs estão associados a supressão tumoral, através da inibição da proliferação e migração celular. O miR-886-5p é associado ao aumento da proliferação celular e inibição da apoptose. Em linfomas, este já foi descrito como estando hiperexpresso em linfomas T, incluindo linfoma anaplásico de grandes células. Conclusão: Os LHC possuem um perfil distinto de expressão de microRNAs, com muitos deles envolvendo mecanismos fundamentais na oncogênese, como ciclo celular e apoptose. Os microRNAs encontrados diferencialmente expressos nos casos recidivados no presente estudo podem estar associados ao comportamento menos indolente destas neoplasias, podendo ser alvo de futuras investigações, incluindo seu uso como potenciais alvos de terapia

ABSTRACT

Introduction: Hodgkin lymphoma (HL) is one of the most common lymphomas in the western world, with about 3 to 4 new cases per 100,000 people. MicroRNAs are small molecules that regulate gene transcription and are associated with the development and progression of neoplasms. In classic HL (CHL), some microRNAs have already been identified from EBV-infected cells. In addition, other microRNAs have already been described in CHL, both in studies where this evaluation was performed in cell cultures and using whole lymph node tumor tissue, but with little correlation with biological behavior. Objective: The present study aims to evaluate the microRNA expression profile in CHL, comparing disease-free cases after therapy with cases that showed recurrences. A total of 106 patients diagnosed with CHL were evaluated. Clinical data were collected and the immunohistochemical markers CD30, CD15, CD20 and CD15 of these cases were evaluated, as well as the presence of EBV by CISH. Twenty cases were selected for the analysis of the expression of 377 microRNAs, 10 cases with recurrences and 10 cases without evidence of disease. For comparison, 8 samples of reactive lymph nodes were selected, 4 with follicular hyperplasia and 4 with paracortical hyperplasia. The expression profile results were submitted to the unsupervised hierarchical clustering method. Results and discussion: The clinico-pathological parameters of this cohort did not differ from those found in the literature. Overall survival and progression-free survival were 92.1% and 83.6% at 5 years, respectively. Factors associated with prognosis in multivariate analysis were age, serum albumin and DHL levels, and staging. The microRNA expression profile of all CHL cases allowed their complete separation from reactive lymph nodes, regardless of the type of hyperplasia. When comparing the cases of CHL, 3 differentially expressed microRNAs were identified miR-502-3p and miR-363, both hypoexpressed in the group containing all relapsed cases and miR-886-5p, hyperexpressed in this group. The first two microRNAs are associated with tumor suppression through inhibition of cell proliferation and migration. The miR-886-5p is associated with increased cell proliferation and inhibition of apoptosis. In lymphomas, it has been described as being overexpressed in T-cell lymphomas, including anaplastic large cell lymphoma. Conclusion: CHLs have a distinct microRNA expression profile, with many involving key mechanisms in oncogenesis, such as cell cycle and apoptosis. The differentially expressed microRNAs found in the relapsed cases in the present study may be associated with the less indolent behavior of these neoplasms and may be the subject of future investigations, including their use as potential therapeutic targets