Distribuição ultraestrutural de colágeno tipo IV em feridas experimentais após tratamento com papaína / Ultrastructural distribution of type IV collagen in experimental wounds after treatment with papaine

RESUMO

RESUMO Modelo do estudo Experimental. Objetivo: Investigar a distribuição de fibras colágeno tipo IV, por microscopia eletrônica de transmissão, em feridas experimentais tratadas com soluções de papaína. Metodologia: Ratos Wistar (n=18), machos, adultos, foram submetidos a procedimento cirúrgico para a retirada de seção quadrada de pele da região cervical, e posteriormente separados em dois grupos Grupo I (n = 9), sem tratamento; e Grupo II (n = 9), tratado com soluções de papaína a 10% (até o 7º dia), 6% (do 8º ao 14º dia) e 4% (do 15º ao 21º dia). Todos os animais foram sacrificados com 7, 14 e 21 dias, e as áreas lesadas retiradas, lavadas em PBS e fixadas em 2,5% de glutaraldeo, 4% de formaldeio recém preparado, em solução tamponada contendo 60 mM Pipes, 20 mM Hepes, 10 mM etilenoglicol-bis- (B-aminoetiléter) - Ácido N, N, N'-tetraacético, KCl 70 mM e MgCl2 5 mM pH 7,2 por 1h; pós-fixadas em solução contendo tetróxido de ósmio a 1%, ferrocianeto a 0,8% e cloreto de cálcio a 5 mM; desidratados em acetona graduada e embebidos em Epon® para confecção de secções finas, coradas com acetato de uranilo e citrato de chumbo, e examinadas em microscópio electrônico de transmissão Zeiss LEO EM 906 (TEM). Resultados: A distribuição das fibras colágeno tipo IV das lesões tratadas com papaína (Grupo II), com 14 e 21 dias, mostraram-se mais organizadas que as fibras do Grupo I. Conclusões: A papaína mostrou-se um importante facilitador para a organização de fibras colágeno tipo IV em feridas experimentais. (AU)

ABSTRACT

ABSTRACT Study model Experimental. Objective: Investigate the distribution of type IV collagen fibers by transmission electron microscopy, in experimental wounds treated with papaine solutions. Methodology: Adult male Wistar rats (n = 18) underwent a surgical procedure to remove a square section of skin from the cervical region, and then separated into two groups Group I (n = 9), without treatment; and Group II (n = 9), treated with papain solutions of 10% (up to the 7th day), 6% (from the 8th to the 14th day) and 4% (from the 15th to the 21st day). All animals were sacrificed at 7, 14 and 21 days, and the injured areas removed, washed in PBS, and fixed in 2.5% glutaraldehyde, 4% freshly prepared formaldehyde in buffered solution containing 60 mM Pipes, 20 mM Hepes, 10 mM ethyleneglycol-bis- (B-aminoethylether) -N, N, N'-tetraacetic acid, 70 mM KCl, and 5 mM MgCl 2 pH 7.2 for 1h; post-fixed in solution containing 1% osmium tethoxide, 0.8% ferrocyanide, and 5 mM calcium chloride; dehy-drated in graduated acetone and soaked in Epon® to make thin sections stained with uranyl acetate and lead citrate and examined under a Zeiss LEO EM 906 (TEM) transmission electron microscope. Results: The distribution of type IV collagen fibers from papaine-treated lesions (Group II) at 14 and 21 days was more organized than Group I fibers. Conclusions: Papaine has proven to be an important facilitator for the organization of type IV collagen fibers in experimental wounds. (AU)