Analysis of hepatitis B surface antigen expression on leucocyte subpopulations by two-color fluorescence with flow cytometry

RESUMEN

En estudios previos hemos demostrado, empleando inmunofluorescencia con anticuerpos monoclonales (mAcs), que el antígeno de superficie (HBsAg) del virus de la hepatitis B (HBV) puede ser detectado en la membrana de las células mononucleares de pacientes infectados. En este trabajo hemos analizado la expresión del HBsAg en diferentes subpoplaciones leucocitarias de pacientes con heaptitis B aguda y crónica empleando citometría de flujo y doble fluorescencia. El HBsAg se detectó con un mAc anti-pre S2 + S conjugado con fluoresceína; las subpoblaciones celulares se caracterizaron con mAcs anti-CD3, CD4, CD8, CD19, CD67 y CD68 conjugados con ficoeritrina. El estudio por citometría de flujo confirmó la expresión del ABsAg por las células mononucleares de pacientes agudos y crónicos, con un porcentaje de células positivas de 7,4 ñ 0,8 por ciento y 9,8 ñ 1,2 por ciento respectivamente. Por análisis de diagramas de doble fluorescencia se seleccionaron las distintas poblaciones a fin de determinar el porcentaje de células que expresaban el HBsAg; el 16,7 ñ 2,4 por ciento de las células B presentaron el antígeno viral, mientras que los valores para las células T, monocitos y granulocitos fueron menores de 4 por ciento. Estos resultados confirman que la expresión del HBsAg en la membrana celular se halla restringida a los linfocitos B de pacientes infectados con el HBV