Novo meio líquido autoclavável, isento de sangue, para isolamento primário de Leishmanias de lesöes tegumentares: I-sua potencialidade no estudo da biologia dos tripanosomatídeos / A new autoclavable culture medium, devoid of blood for isolation of Leishmania from skin lesions: I - its potentiality in the study of the biology of Trypanosomidae

RESUMO

Novo meio, inicialmente denominado, BHYMI (Brain-heart-yeast-meat infusion) logo Rq., constante basicamente de extrato de cérebro, extrado de coraçäo, estrato de carne, extrato de levedura, mais glicose, cloreto de sódio e água, é meio monofásico de baixo custo, disponível no comércio ou facilmente preparado com matérias primas locais, no laboratório, de fácil esterilizaçäo, claro, facilitando a coleta e contagem dos organismos cultivados; foi usado, inicialmente, como a fase líquida dos meios difásicos NNN ou Ducrey, logo como meio de cultura único (exclusivo) para cultivo de leishmanias. É capaz de isolar primariamente leishmania de lesöes, em proporçäo bastante razoáveis, manter cepas isoladas e de funcionar mesmo após ser guardado por 12 meses à temperatura ambiente, como líquido ou por mais tempo quando liofilizado. Seu pH ótimo é de 7.4 a 7.6. Quando enriquecido com soro fetal bovino (S.F.B) na proporçäo de 5, 10, 20 e/ou 30 pôr cento potencia o crescimento das cepas de leishmanias e permite o cultivo de Trypanossomas sp; usado em temperatura mais elevada condiciona o aparecimento de formas amastigotas dos tripanosomatídeos. Quando associado a soro de pato e/ou na presença de cloridrato de tetraciclina estimula a metaciclogenese do Trypanosoma cruzi. Associado ao sangue (Plasma e/ou soro) de galinha estimula a transformaçäo de promastigota de leishmania sp para amastigota em temperatura adequada (35º C). Enriquecido com carväo de sangue de feto bovino, de bovino adulto e de pato ("Charcoal" - sangue dissecado pelo calor lento e permanente, desidratado ou näo, previamente, a vácuo, e moído finamente, para se transformar em pó) - permite o crescimento exuberante de Trypanosomatídeos e mantém os atributos que soros e plasmas frescos ou conservados conferem ao meio, sendo muito bom para manutençäo e crescimento de Trypanosoma cruzi. Este meio pode ser usado como difásico sendo incorporado à peptona ou ágar, como base, tendo como meio líquido o próprio meio, soros consevados de boi, SFB ou soro de pato, meio 199, meio de Grace ou suplemento líquido de Hanks, dependendo da finalidade do cultivo. A associaçäo de extrato de flebotomíneos ou de triatomíneos ao meio permitiu também crescimento aumentado das leishmanias