Detecçäo de monoclonalidade em linfócitos do sangue periférico de pacientes portadores de leucemia linfocítica crônica pela reaçäo em cadeia da polimerase / Detection of monoclonicity in peripheric blood lymphocytes in patients with chronic lymphocytic leukemia by polymerase chain reaction

RESUMO

O rearranjo gênico da cadeia pesada de imunoglobulina é um fenômeno que ocorre precocemente durante a ontogênese do sistema linfóide B, permitindo a aproximaçäo da regiäo variável (VH) da regiäo juncional (JH, as quais flanqueiam a regiäo de diversidade (DH), de tal modo que o fragmento (VHDHJH, originado desse rearranjo torna-se acessível à amplificaçäo pela reaçäo em cadeia da polimerase (PCR). A partir de linfócitos de sangue periférico de 7 pacientes portadores de LLC, utilizando 2 "primers" complementares a sítios conservados das regiöes VH e JH, foi amplificado um fragmento que após eletroforese em gel de poliacrilamida a 12,5 por cento e coloraçäo pela prata, mostrou ser monoclonal. A presença dessa banda monoclonal foi mantida em diluiçöes sequenciais, as quais envolveram a mistura do DNA tumoral com DNA normal, até inclusive o nível de 1 por cento de DNA tumoral. A técnica da PCR revelada pela prata, mostrou-se sensível na detecçäo de monoclonalidade em pacientes portadores de LLC, sem necessidade do uso de sondas.