Verificaçäo da toxigenicidade de cepas de Clostridium perfringens isoladas de material de origem bovina e sua tipificaçäo pelo ensaio imunoenzimático e eletroforese corada para esterase / Toxigenicity verification of strains of clostridiuns perfringens isolateds in cattle materials and its typing by ELISA and electrophoresis for esterase

RESUMO

Cento e oitenta e sete amostras de diferentes tecidos provenientes de 71 bovinos, oriundos de vários Estados do país, foram processados para isolamento de microrganismos anaeróbios, sendo de cada uma delas isolada pelo menos uma cepa, caracterizada como Clostridium spp. Destas, 144 foram identificadas bioquimicamente como C. perfringens selecionando-se, aleatoriamente, 89 delas com o intuito de classificá-las segundo os tipos. As 89 cepas foram assim constituídas fígado 32, conteúdo intestinal 19, rim 14, rúmen 6, sistema nervoso central 5, medula de osso metatarsiano 4, mama 2, sangue 2, baço 2, pulmäo 2 e músculo 1. com os sedimentos, foi realizada a eletroforese corada para esterase e o ensaio imunoenzimático (ELISA), ambos para tipificaçäo das cepas em relaçäo às padräo. As 4 cepas padräo e 10 das isoladas, em suas formas original e após a exaltaçäo da virulência em cobaias, foram também submetidas a eletroforese corada para esterase. Os resultados mostraram que a maioria das cepas, 51 (57,3 por cento), era toxigênica, portanto potencialmente patogênicas; que diferentes órgäos apresentaram cepas com toxigenicidade variável e a predominância do tipo A tanto pelo teste de ELISA (40,4 por cento) quanto pela eletroforese (48,3 por cento), seguido pelo D (33,7 por cento e 22,5 por cento, respectivamente). A toxigenicidade dos extratos de exopolissacarídeos só foi observada quando os níveis de proteína estavam em 0,04 mg/mL e os de carboidrato entre 0,31 a 0,59 mg/mL, tendo sido observada identidade nas cepas toxigênicas determinadas nos sobrenadantes de cultivo e nestes extratos. A eletroforese em relaçäo à sorologia mostrou-se um bom método de classificaçäo, uma vez que estes apresentaram, respectivamente, 94,4 por cento e 86,4 por cento de definiçäo nos resultados. Ressalta-se a ocorrência de 39,3 por cento de identidade nos resultados obtidos nestas duas provas o que permite sugerir o emprego de mais um teste na classificaçäo de C. perfringens. Das cepas cuja virulência foi exaltada, 2 mostraram, em eletroforese corada para esterase, variaçäo no número de bandas, apresentando porém a mesma mobilidade relativa