Standardization of procedures of Plasmodium falciparum antigen preparation for serologic tests

RESUMO

O objetivo deste estudo foi padronizar variaveis tecnicas para o armazenamento de Plasmodium falciparum e de seus componentes antigenicos. Sedimentos de parasitas foram obtidos do cultivo in vitro de P. falciparum e estocados em diferentes temperaturas por diferentes periodos de tempo. De cada variavel, foram extraidos os componentes antigenicos com detergente anfotero Zwittergent na presenca e na ausencia de inibidores de protease e submetidos ou nao a posterior dialise. Os produtos foram estocados por 15, 30 e 60 dias em diferentes temperaturas e caracterizados por SDS-PAGE. A atividade antigenica de cada extrato foi determinada por ELISA e Western blotting usando soros positivos e negativos para anticorpos IgG anti-formas eritrocitarias de P. falciparum. Os extratos antigenicos de parasitas estocados ate 10 dias a -20 graus Celsius ou por 2 meses a -70 graus Celsius e tratados com inibidores de protease, sob as diferentes condicoes de armazenamento, apresentaram melhor definicao das bandas proteicas no SDS-PAGE e Western blot e melhores resultados no ELISA, permitindo diferenciacao segura dos soros positivos e negativos