Genotipificación de cepas de Histoplasma Capsulatum aisladas de pacientes con histoplasmosis asociada al SIDA, mediante el polimorfismo en la longitud de los fragmentos de restricción / Genotypic characterization of Histoplasma capsulatum isolates from AIDS associated-histoplasmosis-patients by using restriction fragment langth polymorphysms (RFLP)

RESUMEN

Introducción: La histoplasmosis es una de las más importantes micosis asociada al síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA) en México. En este trabajo se efectuó la caracterización genotípica por el polimorfismo en la longitud de los fragmentos de restricción (RFLP) del DNA total de 31 cepas de Histoplasma capsulatum de pacientes con histoplasmosis asociada a SIDA, y su comparación con cepas de referencia de México, Panamá y Estados Unidos de America (EUA). Material y métodos: Las cepas fueron plenamente identificadas como H. capsulatum mediante su morfología colonial y microscópica, conversión de micelio a levadura y repoducción de exoantígenos probados por inmunodifusión con sueros específicos. El DNA total de las cepas fue obtenido a partir de micelio a levadura y producción de exoantígenos probados por inmunodifusión con sueros específicos. El DNA total de las cepas fue obtenido a partir de micelio macerado con nitrógeno líquido e incubado en presencia de proteinasa K y dodecilsulfato de sodio. El DNA fue diferido con la enzima HaeIII y los productos separados por electroforesis en agarosa y teñidos con bromuro de etidio. Utilizando el programa SPSS/PC+ se construyó un dendrograma a fin de establecer las relaciones polimórficas entre las cepas. Resultados y discusión: Las cepas formaron 10 grupos según sus perfiles de RFLP, obsevándose dos perfiles principales A y C con 33.3 y 29.1 por ciento de las cepas, respectivamente. Los perfiles restantes estuvieron representados por cepas únicas, a excepción del perfil J con dos cepas que mostraron un patrón similar al de la cepa Downs (clase 1, de EUA), No se encontró ningún perfil semejante a los de las cepas prevalentes en EUA o Panamá. El dendrograma mostró una relación de 85 por ciento entre las cepas de los perfiles de mayor prevalencia (A y C) asimismo del perfil J, además de las cepas Downs y FLs1 de los EUA. Los demás aislados con perfiles únicos se relacionaron en un 75 por ciento con las otras cepas