Aislamiento y caracterizacion del segmento de cadena respiratoria especifico del sistema nitrato reductasa de Escherichia coli K-12. / Isolation and characterization of a respiratory chain segment specific of nitrate reductase system of Escherichia coli K-12

RESUMEN

Vesiculas de membrana provenientes de celulas de Escherichia coli K-12, crecidas en anaerobiosis con nitrato, fueron solubilizadas mediante una metodologia que combina tratamiento con calor a pH neutro y deoxicolato y disociacion con Triton X100. Se separaron tres fracciones diferentes mediante filtracion de los extractos por columnas de Sephadex G-200 y Biogel-A 1.5. Todas las fracciones mostraron actividad benzil viologeno-nitrato reductasa (BV-NR) no obstante su diferente volumen de elucion. Dos fracciones carecieron de citrocromo de tipo b y de actividad nitrato-reductasa dependiente del complejo donador de electrones ascorbato-fenacina metasulfato (AFM-NR). La actividad BV-NR de estas dos fracciones no fue afectada por luz ultravioleta de 360 mm. La tercera fraccion, de mayor tamano que las anteriores, contenia citocromo de tipo b y actividades AFM-NR y BV-NR. Ambas fueron inhibidas por irradiacion con luz ultravioleta de 360 nm. A partir de esta ultima fraccion se logro aislar un compuesto soluble en n-pentano. Sus propiedades espectrofotometricas fueron similares a las de las ubiquinonas. Se discute el posible papel de este compuesto en el segmento de cadena respiratoria especifico del sistema nitrato reductasa del E. coli K-12