Parótida bovina: purificaçäo e caracterizaçäo da fosfatase ácida de baixo peso molecular / Bovine kidney: purification and characterization of acid phosphatase of low molecular weight

RESUMO

A fosfatase ácida de BPM da parótida bovina foi purificada 1.800 vezes até a homogeneidade, com rendimento de 8 por cento, através de um procedimento envolvendo fracionamento com sulfato de amônio, tratamento ácido e cromatografia de troca iônica em SP-Sephadex com eluiçäo por íon-afinidade. Os critérios de pureza utilizados foram a A.E., PAGE, SDS-PAGE, filtraçäo em gel (Superdex HR 70) e análise da composiçäo de aminoácidos. A enzima purificada (A.E. de 100 µmol min-1 mg-1) é composta por uma cadeia polipeptídica simples e possui Mr de 13,6 e 19 kDa, como determinado através da filtraçäo em gel e SDS-PAGE, respectivamente. A composiçäo parcial de aminoácidos (Cys e Trp näo foram determinados) foi obtida após a hidrólise ácida da proteína purificada seguida da análise dos resíduos de aminoácidos e evidenciou a existência de, pelo menos, 151 resíduos de aminoácidos...