Clonagem, expressão e caracterização de antígenos recombinantes do Treponema pallidum com potencial imunodiagnóstico / Cloning, expression and characterization pf Treponema pallidum recombinant antigen with potential for imunodiagnosis

RESUMO

A obtenção do Treponema pallidum para fins de pesquisa e de diagnósticos tem sido através da propagação in vivo, em testículos de coelhos. Considerando o alto custo e baixo rendimento da produção em animais, propomos realizar a clonagem dos principais antígenos do T. pallidum para estabelecer uma fonte constante de antígenos em nosso meio. Três antígenos recombinantes de Treponema pallidum cepa Nichols foram obtidos através da clonagem em PCR. O gene que codifica a proteína madura do Tp47, Tp17 e Tp15, amplificado a partir do DNA cromossômico foi clonado no pGEX4T-2 e transformado em E. coli resultando na expressão de GST-rTp47 e GST-rTp17. A expressão do GST-rTp15 foi obtida com suplementação de `tRNA POT. AGGAGA'. A identidade da proteína recombinante foi confirmada por seqüenciamento de DNA e mapeamento peptídico...