Estrutura, expressão e análise funcional do gene codificado Calmodulina no fungo aquático Blastocladiella emersonii / Structure, expression and functional analysis of the gene encoding Calmodulin in the aquatic fungus Blastocladiella emersonii

RESUMO

O único gene para Calmodulina (CaM) e o cDNA correspondente do quitridiomiceto Blastocladiella emersonii foram isolados e caracterizados. O gene CaM é interrompido por três introns e transcrito como uma única espécie de mRNA de 0,7 kb, codificando uma proteína 91 por cento idêntica à CaM humana. A Calmodulina de B. emersonii foi expressa em Escherichia coli como uma proteína de fusão com Glutationa-S-transferase (GST), purificada por cromatografia de afinidade e clivada da porção GST usando uma protease sítio específico. na presença de `Ca²+ï, a CaM de B. emersonii exibiu uma alteração na mobilidade eletroforética semelhante à CaM bovina e foi capaz de ativar a autofosforilação da proteína quinase dependente de `Ca²+ï-CaM (CaMKII) de cérebro de rato...