Polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism analysis of the ITS2 region for differatiation of Brazilian Biomphalaria intermediate hosts of the Schistosoma mansoni

RESUMO

O sequenciamento da região espaçadora transcrita interna 2 do DNA ribossomal (ITS2-DNAr) das espécies brasileiras gênero Biomphalaria (B. glabrata, B. tenagophila and B. straminea) hospedeiras intermediárias do Schistosoma mansoni no Brasil, permitiu a análise dos sítios de restrição presentes nestas seqüências. A análise do mapa de restrição obtido dessas seqüências nos permitiu selecionar enzimas mais promissoras que gerassem perfis de restrição capazes de identificar essas espécies. Foram testadas 4 enzimas e a enzima HpaII foi selecionada por produzir perfis espécie específicos de fácil visualização em gel de poliacrilamida. A utilização da região ITS2 tem como vantagens a obtenção de um fragmento pequeno de 460bp, o qual pode ser facilmente amplificado por PCR. Neste trabalho, nos demonstramos que a amplificação da região ITS2-DNAr e a restrição deste com a enzima HpaII é uma ferramenta molecular auxiliar a identificação morfológica desses moluscos, bem como para estudos taxonômicos e filogenéticos de planorbídeos neotropicais.