Radiometric studies of Mycobacterium tuberculosis

RESUMO

A atividade metabólica do M. tuberculosis sob diversas condiçöes experimentais foi estudada utilizando um sistema radiométrico automático, capaz de quantificar o 14CO2 produzido pela oxidaçäo de substâncias marcadas com Carbono-14. As experiências realizadas incluíram a) vias metabólicas; b) determinaçäo dos tempos de detecçäo para inoculaçöes de diversas magnitudes; c) efeito da filtraçäo sobre a reprodutibilidade dos resultados; d) influência de meio hostil; e) determinaçäo das concentraçöes inibitórias mínimas para hidrazida, estreptomicina, etambutol e rifampicina; f) tempo de duplicaçäo para o M. tuberculosis e M. bovis. Estes microorganismos metabolizaram até 14CO2 o 14C-formato, (U-14C) acetato, (u-14C) glicerol, (1-14C) ácido palmítico, (1-14C) ácido láurico, (u-14C) L-ácido málico, (U-14C) D-glicose e (1-14C) D-glicose, mas näo (1-14C) L-glicose, (u-14C) glicina ou (U-14C) piruvato. Usando 14C-formato, (1-14C) ácido palmítico ou (1-14C) ácido láurico foi possível detectar 10 bacilos/frasco em 24-48 horas e até 10 bacilos/frasco em 16-20 dias. Resultados reprodutíveis foram obtidos sem filtrar a suspensäo de bactérias, desde que cultivadas em meio 7H9 líquido com 0,05% de polissorbato 80 e homogenizadas antes da experiência. Drogas que bloqueiam a síntese protêica apresentaram concentraçäo inibitória mínima menor com o método radiométrico do que com o convencional. O tempo médio de duplicaçäo para o M. bovis e várias cepas de M. tuberculosis com diversas substâncias marcadas foi 9 + ou - 1 horas