Cultura de células primordiais de medula óssea tipo Dexter: um procedimento laboratorial que mimetiza a hematopoese / Dexter long-term bone marrow culture: a laboratorial procedure that mimics hemopoiesis

RESUMO

Várias técnicas de cultivo têm sido utilizadas na investigação de fatores que influenciam a biologia das células primordiais hemotopoéticas, tornando-se fundamentais na elucidação dos mecanismos que envolvem a hematopoiese. Este trabalho descreve o sistema de cultura idealizado por Dexter e colaboradores, no qual proliferação e diferenciação de células primitivas de medula óssea normal ocorrem quando cultivadas em meio sintético enriquecido com soros de animais e antibióticos. Células do sobrenadante removidas durante a manutença das culturas foram quantificadas e ensaiadas para estimativa de seu conteúdo em progenitores hemotopoéticos. Simultaneamente, desenvolveu-se uma camada de células aderentes, que foram também contadas e ensaiadas para estimativa de seu conteúdo em progenitores. A fração celular do sobrenadante decaiu de 1,65 x 10(elevado a potência 7) para uma média de 1,59 +- 0,42 x 10(elevado a potência 5)células mononucleares/frasco de cultura após a quinta semana de cultivocom um plantôestabelecendo-se entre esta e a décima semanas. Colônias de GM-CFC de ambas frações foram detectadas em todas as semanas ensaiadas e mostraram-se em maior número na camada aderente. Os resultados demonstram que hematopoiese pode ser mantida nas condições experimentais testadas devido ao desenvolvimento de um estroma, o qual demonstrou capacidade de sustentar uma população de células primordiais hematopoéticas em contínuas proliferação e diferenciação por 10 semanas.