Extração de DNA de coágulo sanguíneo humano como método alternativo para estudos de genotipagem / DNA extraction from clotted human blood as a alternative method for genotyping studies
Rev. bras. anal. clin
;
29(3): 151-154, 1997. graf, tab
Article
Dans Portugais
| LILACS
| ID: lil-526279
RESUMO
Foi otimizado um método de extração de DNA de coágulo sangüíneo. Amostras de sangue total colhidas em EDTA e de coágulo foram obtidas de 10 indivíduos não aparentados. Os coágulos foram homogeneizados (sistema Potter-Elvelyn NSE-11R). O DNA foi extraído pelo método de precipitação salina modificado (Clin.Chem.42-S298,1996). A quantificação e a pureza do DNA foram realizadas por espectrofotometria em 260 e 280 nm, sendo a sua integridade verificada por eletroforese em gel de agarose. A qualidade do DNA foi avaliada por amplificação da região polimórfica Ava II do gene do receptor da LDL, por PCR. A quantidade de DNA de coágulo foi semelhante a de sangue total (61,5 ± 11,9 e 60,6 ± 12,6 mg/ml de sangue, respectivamente). A pureza do DNA de coágulo foi semelhante a de sangue total (A260/280=1,87 ± 0,19 e 1,96 ± 0,17, respectivamente). As amostras de DNA apresentaram-se intactas no gel de agarose e sem contaminação com RNA. O rendimento do DNA obtido por este método dói maior que o dos descritos em outros estudos e mostrou-se adequado para análise do polimorfismo genético do receptor da LDL. Portanto, o procedimento de extração de DNA, otimizado em nosso laboratório, é simples, rápido e aplicável para obtenção de DNA de alta qualidade de amostras de coágulo sangüíneo, sendo útil em estudos de genotipagem.
Recherche sur Google
Indice:
LILAS (Amériques)
Sujet Principal:
Coagulation sanguine
/
Tests de coagulation sanguine
/
ADN
/
Techniques de diagnostic moléculaire
/
Gènes
Type d'étude:
Etude diagnostique
Limites du sujet:
Femelle
/
Humains
/
Mâle
langue:
Portugais
Texte intégral:
Rev. bras. anal. clin
Thème du journal:
Pathologie
Année:
1997
Type:
Article
Pays d'affiliation:
Brésil
/
États-Unis d'Amérique
Institution/Pays d'affiliation:
FDA Food & Drug Adminitration/US
/
Universidade de São Paulo/BR
Documents relatifs à ce sujet
MEDLINE
...
LILACS
LIS