Incorporación química de la sonda fluorescente FlAsH en la proteína Hha: aplicación al estudio del complejo Hha/H-NS / Chemical incorporation of fluorescent probe flAsH on the Hha protein: application to the study of complex Hha/H-NS
NOVA publ. cient
; 7(11): 12-20, ene.-jun. 2009. ilus, graf
Article
de Es
| LILACS
| ID: lil-613055
Bibliothèque responsable:
CO242.1
RESUMEN
El objetivo de esta investigación fue realizar estudios de incorporación de la sonda FlAsH como posible herramienta para el estudio in vitro e in vivo de la proteína Hha y de su interacción con H-NS. Se construyó una proteína con la secuencia específica CCPGCC capaz de unir la sonda fluorescente FlAsH; posteriormente se desarrollaron procesos de transformación, expresión y purificación, con los cuales se evidenció que a pesar de introducir una secuencia adicional no nativa a la proteína, se pudo obtener proteína en buena cantidad, estabilidad, rendimiento y con un alto nivel de pureza. La optimización del protocolo de incorporación del FlAsH se hizo teniendo en cuenta el rendimiento y el tiempo de reacción. El complejo FlAsH/HhaCCPGCC se caracterizó mediante fluorescencia y se comprobó mediante MALDI TOF. La incorporación HhaCCPGCC1/ FlAsH no se obtuvo en un alto porcentaje como se esperaba, por esta razón no se pudieron hacer los estudios de interacción entre el complejo de proteínas Hha y H-NS.
Texte intégral:
1
Indice:
LILACS
Sujet Principal:
Sondes moléculaires
/
Protéines
/
Fluorescence
/
Nucléotides
langue:
Es
Texte intégral:
NOVA publ. cient
Thème du journal:
BACTERIOLOGIA
/
BIOLOGIA
Année:
2009
Type:
Article