Validation and development of an immunonephelometric assay for the determination of alpha-1 antitrypsin levels in dried blood spots from patients with COPD / Desenvolvimento e validação de um método de imunonefelometria em amostras de sangue em papel-filtro para a dosagem da alfa-1 antitripsina em pacientes com DPOC
J. bras. pneumol
;
39(5): 547-554, Sep-Oct/2013. tab, graf
Article
Dans Anglais
| LILACS
| ID: lil-695178
ABSTRACT
OBJECTIVE:
To validate and develop an immunonephelometric assay for the determination of alpha-1 antitrypsin (AAT) levels in dried blood spots from COPD patients in Brazil.METHODS:
We determined AAT levels in serum samples and dried blood spots from 192 COPD patients. For the preparation of dried blood spots, a disk (diameter, 6 mm) was placed into a tube, eluted with 200 µL of PBS, and stored overnight at 4ºC. All of the samples were analyzed by immunonephelometry in duplicate. We used the bootstrap resampling method in order to determine a cut-off point for AAT levels in dried blood spots.RESULTS:
The correlation coefficient between the AAT levels in serum samples and those in dried blood spots was r = 0.45. For dried blood spots, the cut-off value was 2.02 mg/dL (97% CI 1.45-2.64 mg/dL), with a sensitivity, specificity, positive predictive value, and negative predictive value of 100%, 95.7%, 27.2%, and 100%, respectively.CONCLUSIONS:
This method for the determination of AAT levels in dried blood spots appears to be a reliable screening tool for patients with AAT deficiency. .RESUMO
OBJETIVO:
Validar e desenvolver um método de dosagem de alfa-1 antitripsina (AAT) por imunonefelometria em amostras de sangue em papel-filtro em pacientes com DPOC no Brasil.MÉTODOS:
Amostras de soro e de sangue em papel-filtro de 192 pacientes com DPOC foram utilizadas para a dosagem de AAT. Para a preparação das amostras de sangue em papel-filtro, um disco do papel com diâmetro de 6 mm foi colocado em um tubo e eluído com 200 µL de PBS, permanecendo por toda a noite a 4ºC. Todas as amostras foram analisadas em duplicata por imunonefelometria. O método de reamostragem bootstrap foi utilizado para a determinação de um ponto de corte para o nível de AAT nas amostras de sangue em papel-filtro.RESULTADOS:
O coeficiente de correlação entre os níveis de AAT em soro e em sangue em papel-filtro foi de r = 0,45. Para as amostras em papel-filtro, o ponto de corte foi de 2,02 mg/dL (IC97% 1,45-2,64 mg/dL), com sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo e valor preditivo negativo de 100%, 95,7%, 27,2% e 100%, respectivamente.CONCLUSÕES:
Este método de determinação dos níveis de AAT em sangue em papel-filtro se mostrou uma ferramenta confiável para o rastreamento de pacientes com deficiência de AAT. .
Texte intégral:
Disponible
Indice:
LILAS (Amériques)
Sujet Principal:
Tests immunologiques
/
Alpha-1-Antitrypsine
/
Déficit en alpha-1-antitrypsine
/
Broncho-pneumopathie chronique obstructive
/
Dépistage sur goutte de sang séché
/
Néphélométrie et turbidimétrie
Type d'étude:
Etude diagnostique
/
Étude observationnelle
/
Étude de prévalence
/
Étude pronostique
/
Facteurs de risque
/
Étude de dépistage
Limites du sujet:
Adulte très âgé
/
Femelle
/
Humains
/
Mâle
Pays comme sujet:
Amérique du Sud
/
Brésil
langue:
Anglais
Texte intégral:
J. bras. pneumol
Thème du journal:
Maladie pulmonaire (spécialité)
Année:
2013
Type:
Article
Pays d'affiliation:
Brésil
Institution/Pays d'affiliation:
Universidade Federal de Sao Paulo/BR
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