HELICOBACTER PYLORI cagA VIRULENCE GENE AND SEVERE ESOGASTRODUODENAL DISEASES: IS THERE AN ASSOCIATION? / Gene de virulência cagA de Helicobacter pylori e doenças esogastroduodenais severas: existe uma associação?

ABSTRACT

ABSTRACT BACKGROUND: Helicobacter pylori colonizes approximately half of the world's human population. Its presence in the gastric mucosa is associated with an increased risk of gastric adenocarcinoma, gastric lymphoma, and peptic ulcer disease. In Brazil, the high prevalence of H. pylori infection is a serious health problem. H. pylori virulence factors are associated with an increased risk of serious gastrointestinal disorders. The cagA gene encodes a cytotoxin-A-associated antigen (CagA) that is involved in bacterial pathogenicity. H. pylori strains carrying the cag pathogenicity island (cag-PAI) are significantly associated with severe clinical outcomes and histopathological changes. OBJECTIVE: The present study aims to investigate the prevalence of the cagA gene among H. pylori isolates from patients with different gastric pathologies. Further, the study hopes to verify its association with clinical outcomes. In addition, phylogenetic analysis was performed on cagA-positive H. pylori strains from patients with severe and non-severe diseases. METHODS: Gastric specimens were collected through a biopsy from 117 patients with different esogastroduodenal diseases. DNA was extracted from these gastric specimens and the polymerase chain reaction was performed to amplify the gene fragments corresponding to the 16S ribosomal RNA and cagA genes using specific primers. The polymerase chain reaction products of selected samples positive for cagA were sequenced. The sequences were aligned with reference sequences from the National Center for Biotechnology Information (NCBI) (Bethesda/USA), and a phylogenetic tree was constructed. RESULTS: H. pylori was detected in 65.9% (77/117) of Brazilian patients with different gastroduodenal disorders. Overall, 80.5% (62/77) of the strains were cagA-positive. The ages of patients with cagA-positive strains (15 males and 47 females) ranged from 18 to 74 years. The lesions were categorized as non-severe and severe according to the endoscopic and histopathological reports the most prevalent non-severe esogastroduodenal lesion was gastritis 54/77 (70.12%), followed by esophagitis 12/77 (15.58%) and duodenitis 12/77 (15.58%). In contrast, the most prevalent severe lesions were atrophy 7/77 (9.09%), followed by metaplasia 3/77 (3.86%) and gastric adenocarcinoma 2/77 (2.59%). Phylogenetic analyses performed with the partial sequences of the cagA gene obtained from local strains were grouped in the same clade. No differences in phylogenetic distribution was detected between severe and non-severe diseases. CONCLUSION: The cagA gene is highly prevalent among H. pylori isolates from gastric lesions in Brazilian patients. The presence of the cagA gene was not considered a marker of the severity of esogastroduodenal lesions in the present study. This is the first study to investigate the phylogenetic population structure of H. pylori strains in a Brazilian capital, which may improve our understanding of the clinical outcome of H. pylori infection.

RESUMO

RESUMO CONTEXTO: Helicobacter pylori coloniza aproximadamente metade da população humana mundial. A presença do microrganismo na mucosa gástrica está associada a um risco aumentado de adenocarcinoma gástrico, linfoma gástrico e úlcera péptica. No Brasil, a alta prevalência de infecção por H. pylori é um grave problema de saúde. Os fatores de virulência de H. pylori estão associados a risco aumentado de distúrbios gastrointestinais severos. O gene cagA codifica um antígeno associado à citotoxina A (CagA) que está envolvido na patogenicidade bacteriana. As cepas de H. pylori portadoras da ilha de patogenicidade cag (cag-PAI) estão significativamente associadas a desfechos clínicos severos e alterações histopatológicas. OBJETIVO: O presente estudo tem como objetivo investigar a prevalência do gene cagA entre isolados de H. pylori de pacientes com diferentes desordens gástricas, bem como verificar sua associação com desfechos clínicos. Além disso, a análise filogenética foi realizada em cepas de H. pylori cagA-positivas de pacientes com doenças severas e não severas. MÉTODOS: Amostras gástricas foram coletadas por meio de biópsia gástrica de 117 pacientes com diferentes doenças esogastroduodenais. O DNA foi extraído das amostras e utilizado para amplificar os fragmentos gênicos correspondentes aos genes RNA ribossomal 16S e cagA, através da reação em cadeia da polimerase. Os produtos da reação em cadeia da polimerase de amostras selecionadas positivas para cagA foram sequenciados e as sequências foram alinhadas com sequências de referência do National Center for Biotechnology Information (NCBI) (Bethesda/EUA). As análises filogenéticas foram realizadas a partir do sequenciamento e construção da árvore filogenética. RESULTADOS: H. pylori foi detectado em 65,9% (77/117) dos pacientes brasileiros com diferentes distúrbios gastroduodenais. No total, 80,5% (62/77) das cepas foram cagA-positivas. As idades dos pacientes com cepas cagA-positivas (15 homens e 47 mulheres) variaram de 18 a 74 anos. As lesões foram categorizadas como não severas e severas de acordo com o laudo endoscópico e histopatológico. A lesão esogastroduodenal não severa mais prevalente foi gastrite 54/77 (70,12%), seguida de esofagite 12/77 (15,58%) e duodenite 12/77 (15,58%). Em contraste, as lesões severas mais prevalentes foram atrofia 7/77 (9,09%), seguida de metaplasia 3/77 (3,86%) e adenocarcinoma gástrico 2/77 (2,59%). As análises filogenéticas realizadas com as sequências parciais do gene cagA obtidas de cepas locais foram agrupadas no mesmo clado. Nenhuma diferença na distribuição filogenética foi detectada entre doenças severas e não severas. CONCLUSÃO: O gene cagA é altamente prevalente entre isolados de H. pylori de lesões gástricas em pacientes brasileiros. A presença do gene cagA não foi considerada um marcador de severidade das lesões esogastroduodenais no presente estudo. Este é o primeiro estudo a investigar a estrutura filogenética da população de cepas de H. pylori em uma capital brasileira. Esses resultados irão contribuir para o entendimento sobre o desfecho clínico da infecção por H. pylori.