Viabilidade de fibroblastos do ligamento periodontal estimulados com sobrenadante necrótico de células de polpa dental in vitro / Viability of periodontal ligament fibroblasts stimulated with necrotic supernatant from dental pulp cells in vitro

RESUMO

As células necróticas são capazes de induzir a instalação de processos inflamatórios importantes, mesmo em ambientes estéreis, e o papel de remanescentes necróticos pulpares ainda não é conhecido na periodontite apical. O objetivo deste estudo foi investigar a capacidade de modulação in vitro de fibroblastos do ligamento periodontal (FLP) pelo sobrenadante necrótico (SN) de polpa dental. Cultura de fibroblastos de polpa dental (FPD) (n=1) e de ligamento periodontal (n=1) foram obtidas a partir do biobanco. Os FPDs passaram por ciclos de congelamento/descongelamento e o SN submetido a diluições 1/2, 1/10 e 1/20. Os FLPs foram estimulados com o SN de FPD. Para avaliar se o SN interfere na viabilidade celular do FLP foi realizado o ensaio de alamarBlue nos períodos de 24h, 48h e 72h. Nos grupos 24h, 48h e 72h não se observou diferença estatisticamente significativa. Porém, foi notado que no grupo de 72h o tratamento com SN resultou em uma maior ativação celular nas concentrações 1/10 e 1/20 em relação ao controle (p<00,5). O ensaio de MTT avaliou o efeito do SN na viabilidade celular do FLP. No grupo de 24h o SN resultou em uma ativação celular expressiva nas concentrações 1/2, 1/10 e 1/20 em relação ao controle. Nos grupos 48h e 72h não houve diferença estatisticamente significativa (p< 0,05). Os FLPs foram tratados com SN de FPD para avaliar os efeitos da produção de citocinas. A produção de OPG se apresentou maior no grupo com diluição 1/2 em comparação com as demais (p<0,05). A IL-6 apresentou-se aumentada no grupo com menor diluição e reduzida nos grupos com SN mais diluído (p<0,05). A expressão de CCL2 demonstrou-se menor nos grupos com diluição 1/10 e 1/20 (p<0,05). Diante desses resultados, observou-se que o sobrenadante de fibroblastos de polpa dental foi capaz de ativar células de ligamento periodontal in vitro modulando a produção de OPG, IL-6 e CCL2 de forma diluição-dependente.