Improvement of the enrichment used in the EMJH médium (Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris) for the cultivation of Leptospira spp

ABSTRACT

Abstract Changes were made to the original formulation of the EMJH medium (Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris) enrichment and some aspects such as growth time of Leptospira and utilization in the microscopic agglutination test (MAT) were evaluated and compared to the original enrichment and to a commercially available enrichment (DIFCOÔ). Leptospira samples (24 antigens) that make up our panel of antigens used in MAT were used, among them, reference and autochthonous strains isolated in Brazil. The samples were grown individually in the EMJH medium under the three previously mentioned conditions (adapted enrichment, original enrichment and commercial enrichment). In addition, 89 blood serums from domestic and wild animals were analyzed by MAT using the antigens grown in these media. All samples tested grew efficiently with the adapted enrichment, and the MAT results were satisfactory. Therefore, other laboratories could also benefit from the use of this adapted enrichment when culturing the Leptospira strains applied in their MAT panels.

RESUMEN

Resumen Realizamos cambios en la formulación original del enriquecimiento del medio Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris y evaluamos algunos aspectos, como el tiempo de crecimiento de Leptospira y la utilización en la prueba de aglutinación microscópica (MAT), comparándolos con el enriquecimiento original y un medio de enriquecimiento comercialmente disponible (DIFCOÔ). Se usaron muestras de Leptospira (24 antígenos) que componen nuestro panel de antígenos utilizados en la MAT, entre ellos, cepas autóctonas y de referencia aisladas en Brasil. Las muestras se cultivaron individualmente en medio Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris en las tres condiciones mencionadas (enriquecimiento adaptado, enriquecimiento original y enriquecimiento comercial). Adicionalmente, 89 sueros de sangre de animales domésticos y salvajes fueron analizados por MAT usando los antígenos cultivados en estos medios. Todas las muestras analizadas crecieron eficientemente con el enriquecimiento adaptado y los resultados de la MAT fueron satisfactorios. Por lo tanto, otros laboratorios también podrían beneficiarse del uso de este enriquecimiento adaptado al cultivar las cepas de Leptospira aplicadas en sus paneles MAT.