Comparación de pruebas moleculares para el diagnóstico de Leishmania spp. en lesiones cutáneas con baja carga parasitaria

RESUMEN

Introducción: La leishmaniasis cutánea (LC) es un problema grave de salud pública en Panamá. El diagnóstico de esta parasitosis ha sido siempre desafiante, no sólo debido a su similitud con otras infecciones dérmicas, sino también a características particulares de las lesiones, como cargas parasitarias bajas. ​Materiales y Métodos: En este estudio, se evaluaron mediante cuatro métodos moleculares, 235 muestras de ADN procedentes de lesiones con frotis negativos por LC obtenidas durante el período 2015-2019. Resultados: Los resultados señalan que las sensibilidades encontradas fueron de 75.6% (IC 0.6234-0.8709) para la PCR kDNA-Género específico, de 66.7% (IC 0.5359-0.776) para la PCR Hsp70-Género específico y de 77.6% (IC 0.645-0.8949) para la qPCR 18S ribosomal. Todas las pruebas obtuvieron un valor predictivo positivo de 100%, mientras que el valor predictivo negativo más alto fue con la qPCR (80.58%) y el más bajo con el PCR Hsp70-Género específico (73.2%). En cuanto a la precisión de diagnóstico se obtuvo un rango mayor del 82% en todas las pruebas evaluadas. Conclusión: Este estudio confirma la buena sensibilidad de la PCR kDNA-Viannia para el análisis de lesiones de LC con baja carga parasitaria. Esta metodología es relativamente fácil de estandarizar, por lo que se recomienda su uso en laboratorios clínicos regionales de Panamá. Aun cuando la qPCR 18S ribosomal presentó una sensibilidad relativamente menor, el uso de esta metodología debe ser también considerada por su facilidad de uso, menor tiempo de ejecución y capacidad de cuantificación. (provisto por Infomedic International)

ABSTRACT

Introduction: Cutaneous leishmaniasis (CL) is a serious public health problem in Panama. The diagnosis of this parasitosis has always been challenging, not only because of its similarity to other dermal infections, but also because of characteristics of the lesions, such as low parasite loads. Materials and Methods: In this study, 235 DNA samples from smear-negative lesions by LC obtained during the period 2015-2019 were evaluated by four molecular methods. Results: The results indicate that the sensitivities found were 75.6% (CI 0.6234-0.8709) for kDNA-Gene-specific PCR, 66.7% (CI 0.5359-0.776) for Hsp70-Gene-specific PCR and 77.6% (CI 0.645-0.8949) for 18S ribosomal qPCR. All tests obtained a positive predictive value of 100%, while the highest negative predictive value was with qPCR (80.58%) and the lowest with Hsp70-Gene-specific PCR (73.2%). In terms of diagnostic accuracy, a range greater than 82% was obtained in all the tests evaluated. Conclusion: This study confirms the good sensitivity of kDNA-Viannia PCR for the analysis of LC lesions with low parasite load. This methodology is relatively easy to standardize, so it is recommended for use in regional clinical laboratories in Panama. Although 18S ribosomal qPCR showed a relatively lower sensitivity, the use of this methodology should also be considered because of its ease of use, shorter execution time and quantification capacity. (provided by Infomedic International)