Detección del polimorfismo T991T en familias cubanas con diagnóstico clínico de la enfermedad de Wilson / Detection of T991T Polymorphism in Cuban Families with Clinical Diagnosis of Wilson’s Disease

RESUMEN

Fundamento la enfermedad de Wilson se caracteriza por la acumulación de cobre, fundamentalmente en el hígado y cerebro. Se transmite con un patrón de herencia autosómico recesivo. La causa molecular que la provoca son las mutaciones en el gen atp7b, que se encuentra en el cromosoma 13. Se han informado en la literatura más de 139 polimorfismos en el gen atp7b, tanto en los exones como en los intrones.Objetivo: identificar el polimorfismo T991T en pacientes cubanos con diagnóstico clínico de enfermedad de Wilson.Métodos: se realizó un estudio descriptivo, en el Centro Nacional de Genética Médica, durante el período 2011-2013, que incluyó 35 pacientes con diagnóstico clínico de enfermedad de Wilson. Para la amplificación del fragmento de interés, se utilizó la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa y para identificar los cambios conformacionales, la técnica de Polimorfismo Conformacional de Simple Cadena, en el exón 13 del gen atp7b. El polimorfismo T991T fue identificado por secuenciación del fragmento analizado y la mutación L708P por digestión enzimática.Resultados: la frecuencia alélica del polimorfismo T991T en los 35 pacientes cubanos estudiados fue de 10 %. Las manifestaciones hepáticas fueron las más frecuentes (57,1 %). En el 71,4 % de los pacientes que presentaron el polimorfismo T991T se identificó además el polimorfismo K832R. En un paciente se identificó la mutación L708P.Conclusión la identificación del polimorfismo T991T permitirá en un futuro inmediato el diagnóstico molecular por métodos indirectos y su correlación con las manifestaciones clínicas presentes en los pacientes con enfermedad de Wilson.

ABSTRACT

Foundation Wilson’s disease is characterized by the accumulation of copper, mainly in the liver and the brain. It is transmitted with an autosomal recessive inheritance pattern. The mutations of atp7b gene are the cause which produces it, which is found in chromosome 13.  In literature it has been informed more than 139 polymorphisms in atp7b gene, both in exons and in introns.Objective: To identify T991T polymorphism in Cuban patients with clinical diagnosis of Wilson’s disease.Methods: A descriptive study was done, in the Center of Medical Genetic, during the period of 2011-2013, which included 35 patients with clinical diagnosis of Wilson’s disease. For the amplification of fragment of interest, it was used the Polymerase Chain Reaction technique and to identify conformational changes, the Simple Chain Conformational Polymorphism technique, in exon 13 of the atp7bgene. T991T polymorphism was identified by the sequence of the fragment analyzed and the L708P mutation by enzymatic digestion.Results: T991T polymorphism allele frequency in the 35 Cuban studied patients was of 10 %. Hepatic manifestations were the most frequent (57.1 %). In the 71.4 % of the patients who presented T991T polymorphism it was identified K832R polymorphism as well. In one patient it was identified mutation L708P.Conclusion: the identification of T991T polymorphism will allow in the immediate future the molecular diagnosis by indirect methods and its correlations with clinical manifestations   present in patients with Wilson’s disease.