Comparação de dados clínicos e imunológicos entre indivíduos geneticamente suscetíveis à periodontite pela presença de um haplótipo no gene da IL-4 e indivíduos geneticamente protegidos contra a periodontite / Comparison of clinical and immunologic data between individuals genetically susceptible to periodontitis and genetically protected against periodontitis

RESUMO

A Doença Periodontal (DP), desencadeada pela infecção de microrganismos periodontopatogênicos tem sua progressão e morbidade grandemente influenciada pela suscetibilidade genética do hospedeiro. Dentre as várias citocinas produzidas pelo periodonto inflamado está a Interleucina 4 (IL-4). Estudos recentes realizados por este grupo demonstraram que os polimorfismos -590(T/A), +33(T/G) e VNTR (Inserção/Deleção) no gene IL4, bem como haplótipos formados por eles, estavam associados à periodontite crônica, mesmo após ajustes para idade, gênero, cor da pele e hábito de fumar. O objetivo do presente estudo foi testar a hipótese de que há diferença nos índices clínicos periodontais e nos níveis de IL-4 no fluido sulcular gengival de pacientes suscetíveis e protegidos, e como segundo objetivo foi avaliar a resposta ao tratamento periodontal não-cirúrgico, em função da referida carga genética. Foram selecionados 62 pacientes que carregavam um haplótipo no gene IL4 que confere suscetibilidade genética à periodontite crônica ou que confere proteção contra o desenvolvimento desta, tendo sido subdivididos quanto à presença ou ausência da periodontite crônica. Cada paciente foi submetido a exame clínico periodontal e coleta de fluido sulcular (FS) antes (baseline), 45 e 90 dias após finalizado o tratamento periodontal não-cirúrgico. A citocina IL-4 foi quantificada por meio de teste imunoenzimático (ELISA). Como resultado verificou-se que, comparando indivíduos geneticamente suscetíveis à DP com os geneticamente protegidos, no período baseline, houve diferença estatisticamente significante dos índices de placa visível, sangramento marginal e sangramento à sondagem considerando tais parâmetros clínicos de boca toda. Não houve diferença significante quanto à resposta ao tratamento periodontal, avaliando os índices clínicos periodontais. A quantidade total e a concentração de IL-4 foi significativamente diferentes entre os indivíduos geneticamente suscetíveis à DP e os geneticamente protegidos, nos períodos de 45 e 90 dias após o tratamento periodontal nãocirúrgico. A presença do haplótipo que confere suscetibilidade genética à DP ou proteção contra o desenvolvimento desta correlacionou-se com determinados parâmetros clínicos periodontais em função da produção de IL-4 ou do volume de FS. Concluiu-se que a suscetibilidade genética à DP conferida pela presença de haplótipos no gene IL4 influenciou no período baseline alguns dos índices clínicos periodontais avaliados, bem como a produção da citocina IL-4 após 45 e 90 dias de finalizado o tratamento periodontal não-cirúrgico. Além disso, a correlação de parâmetros clínicos periodontais com a produção de IL-4 ou com o volume de FS foi significativa em grupos com diferentes cargas genéticas. Futuros estudos in vitro poderão contribuir para compreender como os diferentes haplótipos influenciam a taxa de transcrição e tradução da proteína IL-4, bem como isso poderia ser influenciado pela ação de microrganismos, tal como ocorre na doença periodontal

ABSTRACT

Periodontal disease (PD) is an encompasses multifactorial disease. Genes belonging to the immune response have been investigated as a potential factor influencing the susceptibility to PD. Among the various cytokines produced by the inflamed periodontium is interleukin 4 (IL-4), which is a potent downregulator of macrophage function that inhibits the secretion of proinflammatory cytokines Previously, we identified a haplotype formed by - 590(T/A), +33(T/G) and VNTR (variable number of tandem repeats; I/D) polymorphisms in the IL4 gene that conferred susceptibility to or protection against PD. The aim of this study was to investigate whether subjects with genetic susceptibility [S] to PD compared to genetically protected [P] individuals would present both differences in the clinical parameters and levels of IL-4 in sulcular fluid, and if these were different 45 and 90 days after non-surgical periodontal treatment. Those patients were subdivided in genetically susceptible without PD (healthy) (SH, n=16), genetically susceptible with PD (SPD, n=16), genetically protected without PD (PH, n=20), and genetically protected with PD (PPD, n=10). Periodontal clinical examination and collection of periodontal sulcular fluid were performed for each patient at baseline, 45 and 90 days after finishing the non-surgical periodontal treatment. The cytokine IL-4 was measured by the use of Enzyme Immunoassay (ELISA). The results showed that comparing the genetically susceptible with the genetically protected individuals to PD, there were significant differences in clinical parameters plaque index (p=0.013), bleeding index (p=0.005), bleeding on probing (p=0.015) at baseline. There were no significant differences in clinical parameters 45 and 90 days after completion of the periodontal treatment. The total amount and concentration of IL-4 was different between individuals after non-surgical treatment. The presence of haplotype that conferred susceptibility to or protection against PD was correlated with clinical periodontal parameters based on sulcular fluid production of IL-4. It was concluded that genetic susceptibility to PD conferred by the presence of haplotypes in the gene IL4 influenced at baseline some of the clinical periodontal parameters evaluated, well as the production of the cytokine IL-4 after 45 and 90 days of the nonsurgical finalized periodontal treatment. Furthermore, the correlation of clinical periodontal parameters with the production of IL-4 or with the volume of FS was significant in groups with different genetic load. Future in vitro studies could contribute to understand how different haplotypes could influence the rate of transcription and protein translation of IL-4, as well as how this could be influenced by the action of microorganisms, such as it occurs in the periodontal disease