Efeito antimicrobiano de múltiplas sessões de terapia fotodinâmica sobre biofilmes de Candida spp. formados in vitro / Antimicrobial effect of photodynamic therapy multiple-sessions on biofilms of Candida spp. formed in vitro

RESUMO

Vários estudos in vitro demonstraram que a terapia fotodinâmica (TFD) apresenta efeitos antimicrobianos sobre as leveduras do gênero Candida, podendo representar uma terapia alternativa e coadjuvante no tratamento da estomatite protética. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito antifúngico de múltiplas sessões de terapia fotodinâmica sobre biofilmes de Candida formados na superfície de resina acrílica. Para realização desse trabalho, biofilmes monotípicos de C. albicans, C. tropicalis e C. glabrata foram formados, durante 5 dias, em corpos de prova confeccionados com resina acrílica termicamente ativada. A seguir, foram realizadas 5 sessões de terapia fotodinâmica, em intervalos de 24 horas, sobre os biofilmes previamente formados. Foram avaliadas 2 modalidades de terapia fotodinâmica, incluindo aplicação de Laser de Arseneto de Gálio e Alumínio associado ao fotossensibilizador azul de metileno ou terapia com Diodo Emissor de Luz (LED) verde e fotossensibilizador eritrosina. Os grupos controles foram tratados apenas com solução fisiológica. Após a realização de cada aplicação da terapia fotodinâmica, os biofilmes aderidos aos corpos de prova foram submetidos à homogeneização ultra-sônica e as células dispersas foram semeadas em Ágar Sabouraud Dextrose (37 °C / 48 h) para contagem de unidades formadoras de colônias (UFC/corpo de prova). Os resultados obtidos foram submetidos à análise de Variância (ANOVA) e teste de Tukey considerando-se nível de significância de 5%. Para todos os micro-organismos os resultados da redução de UFC (log) foram comparados aos controles da primeira, segunda, terceira, quarta e quinta aplicações com o Laser e com o LED. Para C. glabrata as reduções para cada aplicação foram respectivamente de 3,22 e 4,83; 1,49 e 2,21; 1,6 e 2.05; 1,53 e 5,09 e 2,75 e 3,03. Para C. albicans foram 0,12 e 0,36; 0,54 e 0,93; 0,15 e 0,06; 0,96 e 0,75 e 0,89 e 1,82. C. tropicalis apresentou as seguintes reduções 0,16 e 0,14; 1,52 e 2,84;...

ABSTRACT

Several in vitro studies have demonstrated the antimicrobial effects of photodynamic therapy (PDT) against yeast of the genus Candida, representing an alternative or coadjuvant tool for the treatment of denture stomatitis. Therefore, the objective of this study was to evaluate the antifungal effect of multiple PDT sessions on Candida biofilms formed on the surface of acrylic resin. For this purpose, monotypic biofilms of C. albicans, C. tropicalis and C. glabrata were grown for 5 days on test specimens consisting of thermally activated acrylic resin. Next, the biofilms formed were submitted to five sessions of PDT at intervals of 24 hours. Two modalities of PDT were evaluated a gallium-aluminum-arsenide laser combined with methylene blue as photosensitizer, and a green light-emitting diode (LED) and erythrosine as photosensitizer. The control groups were only treated with saline. After each application of PDT, the biofilms adhered to the test specimens were submitted to ultrasonic homogenization and the dispersed cells were seeded onto Sabouraud dextrose agar (37 oC, 48 h) for determination of colony-forming units (CFU/test specimen). Analysis of variance (ANOVA) and the Tukey test were used for analysis of the results, adopting a level of significance of 5%. For all microorganisms, the results of CFU(log) reduction were compared to controls of the first, second, third, fourth and fifth application of the laser and LED. For C. glabrata, the reductions in each application were, respectively, 3.22 and 4.83, 1.49 and 2.21, 1.6 and 2.05, 1.53 and 5.09, and 2.75 and 3.03. Reductions of 0.12 and 0.36, 0.54 and 0.93, 0.15 and 0.06, 0.96 and 0.75, and 0.89 and 1.82 were observed for C. albicans. Candida tropicalis showed the following reductions 0.16 and 0.14, 1.52 and 2.84, 1.86 and 2.1, 1.81 and 2.39, and 0.86 and 1.36. In conclusion, laser- and LED-mediated PDT were effective in reducing Candida biofilms. For all microorganisms tested, the highest microbial ...