Atividade antifúngica e alterações morfológicas induzidas pelo óleo essencial de Cinnamomum cassia frente cepas de Candida albicans isoladas de pacientes HIV positivos / Antifungal activity and morphological alterations induced by Cinnamomum cassia essential oil against Candida albicans strains isolated from HIV-positive patients

RESUMO

Objetivo: Avaliar a atividade antifúngica, o efeito sobre a cinética de morte microbiana e as alterações morfológicas do óleo essencial de Cinnamomum cassia (canela) sobre cepas de Candida albicans isoladas de pacientes HIV positivos e cepa padrão (ATCC 76485). Método: Suspensões fúngicas (106UFC/mL) foram preparadas a partir de amostras clínicas (n=15) e padrão (n=1) de C. albicans. Emulsões do óleo essencial foram avaliadas em concentrações que variaram entre 1024µg/mL e 4µg/mL. A ação antifúngica foi determinada pela Concentração Inibitória Mínima (CIM), por meio da técnica da microdiluição. Realizou-se o ensaio de cinética sobre a morte das leveduras (tempos 0, 30, 60, 180 minutos e 24h), bem como a avaliação da interferência do óleo essencial sobre a micromorfologia das cepas. O miconazol (50 µg/mL) foi utilizado como controle e a análise estatística se deu pelos testes Kruska-Wallis e Dunn (p menor que 0,05). Resultados: A CIM variou entre 64 e 128 µg/mL, frente às cepas testadas. Para o teste de cinética, verificou-se ação antifúngica de C. cassia nas concentrações CIM, 2xCIM e 4xCIM, em todos os tempos analisados. O controle de crescimento foi estatisticamente diferente do miconazol e do óleo essencial (p menor que 0,01), não sendo observada diferença estatística entre o efeito do miconazol e do produto natural (p maior que 0,05). Alterações na micromorforlogia das cepas (ausência de pseudohifas e clamidoconídeos) foram verificadas na CIM. Conclusão: O óleo essencial de C. cassia, semelhante ao miconazol, apresentou atividade antifúngica e efeito sobre a cinética de morte microbiana. Os produtos avaliados provocaram alterações sobre a micromorfologia das cepas testadas.

ABSTRACT

Objective: To evaluate the antifungal activity, the effect on microbial death kinetics and the morphological alterations caused by Cinnamomum cassia (canela) essential oil against Candida albicans strains isolated from HIV-positive patients and a reference strain (ATCC 76485). Method: Fungal suspensions (106CFU/mL) were prepared from clinical (n=15) and reference (n=1) C. albicans samples. Essential oil emulsions were evaluated at concentrations between 1024 µg/mL and 4 µg/mL. The antifungal action was determined by the minimal inhibitory concentration (MIC) using the microdiluition technique. The kinetics assay for yeast death was performed (times: 0, 30, 60, 180 minutes and 24 h) as well as evaluation of the interference of the essential oil on the micromorphology of the strains. Miconazol (50 µg/mL) was used as a control. The statistical analysis was performed by the Kruskal-Wallis and Dunn tests (p less than 0.05). Results: The MIC varied from 64 to 128 µg/mL for the tested strains. The kinetics assay revealed antifungal action of the C. cassia at the concentrations MIC, 2xMIC and 4xMIC, at all analyzed times. Growth control was significantly different for miconazol and for the essential oil (p less than 0.01), with no statistically significant difference between the effect of miconazol and the natural product (p greater than 0.05). Alterations in the micromorphology of the strains (absence de pseudohifas and chlamydoconidias) were verified in the MIC. Conclusion: In the same way as miconazol, C. cassia essential oil presented antifungal activity and effect on microbial death kinetics. The tested products caused alterations on the micromorphology of the tested strains.